反硝化细菌的筛选及应用研究_李妍

2008，14（5）：43-44天津农业科学TianjinAgriculturalSciences近年来，反硝化细菌的研究成为污水处理的热点，它作为污水脱氮的一种生物方式，对于控制水体富营养化、处理污水等环境问题有很广阔的应用前景。天津市西青区、北辰区、蓟县、宝坻县、静海县部分地区农田灌溉水硝酸盐含量偏高。降低水体及土壤中硝酸盐浓度对于提高水质和蔬菜品质，增强人体健康都具有非常重要的意义。反硝化细菌的筛选方法有很多，如李平等[1]用琥珀酸钠、重金属等微量元素作为筛选培养基，用合成的人工废水来测定菌株的反硝化能力；孔庆鑫等[2]采用间歇曝气法富集，以KCN作为选择培养基，筛选到一株高效好氧反硝化细菌等。因此，我们试图选择一种试验安全的筛选方法并将其应用于硝酸盐污染的农田灌溉水，为深入研究在硝酸盐污染的水体及土壤中进行生物脱氮提供理论及技术依据。1材料和方法1.1材料本试验的土壤样品采自天津、沈阳、哈尔滨等地菜园。初筛培养基1：柠檬酸钠5.0g，KNO32.0g，KH2PO41.0g，MgSO4·7H2O0.2g，蒸馏水1L，pH7.2。复筛培养基2：Giltay培养基[3]。YB培养基3：黄豆芽200g，葡萄糖20g，蒸馏水1L，pH7.2。1.2方法1.2.1分离方法将分散后的土壤样品梯度稀释涂布于初筛培养基上，并将初筛到的菌株进一步分离、纯化。将纯化后的菌株按张玉芹[4]方法接于装有10mL复筛培养基的试管中，28℃培养，7d内观察试管内培养基的颜色及产气特性。将能够使培养基变蓝且能够产气的菌株转移至柠檬酸盐反硝化培养基斜面保存备用。1.2.2菌株反硝化能力的测定调节柠檬酸盐培养基中NO3-浓度，使其达到150mg/kg，之后分装于250mL三角瓶中，每瓶100mL，120℃灭菌30min。接1环反硝化细菌于三角瓶中，28℃、150r/min连续培养1～4d，定时检测培养基硝酸盐的浓度变化，同时做空白对照。土壤肥料与节水灌溉反硝化细菌的筛选及应用研究李妍，赵琳娜，何宗均，吴迪，李玉华，高贤彪（天津市农业资源与环境研究所，天津300192）摘要：从天津市等地的菜园土中筛选出6株具有较强反硝化能力的菌株，可使柠檬酸盐培养基中硝酸盐浓度降低30%～80%，其中以F1401效果最好。对F1401在农田灌溉水中的硝酸盐降解能力进行测定，结果表明，在静置条件下，随着YB培养