一种新的好氧反硝化菌筛选方法的建立及新菌株的发现_孔庆鑫

应用与环境生物学报　2005,11(2):222～225　　ChinJApplEnvironBiol=ISSN1006-687X　2005-04-25　一种新的好氧反硝化菌筛选方法的建立及新菌株的发现*孔庆鑫1,2　李君文1**　王新为1　金敏1　古长庆1(1军事医学科学院卫生学环境医学研究所　天津　300050)(2杭州市疾病预防控制中心　杭州　310006)摘　要　利用间歇曝气富集,氰化钾(KCN)选择培养基筛选好氧反硝化的细菌,通过形态学特征、生理生化反应及16SrDNA同源性比较对筛得菌株进行鉴定,并对其好氧反硝化相关基因napA进行扩增并测序比较.筛选到一株可以柠檬酸钠为碳源,硝酸钾为氮源,进行好氧反硝化的细菌.在溶解氧(DO)为(9.0±0.5)mg/L的培养基中,该菌株5d内将硝态氮由282.0mgL-1降解至149.2mgL-1,其硝态氮去除率为46.47ngmg-1min-1,同时亚硝态氮仅有少量的积累.经鉴定,初步判定它为假单胞菌属,命名为Pseudomonassp.Y2-1-1.从其基因组中扩增出与好氧反硝化相关的周质硝酸盐还原酶(NAR)的亚基napA基因,并与已报道的napA基因进行Blast比较,发现具有较大差别.利用间歇曝气富集,氰化钾(KCN)选择培养基筛选好氧反硝化的细菌是非常有效的.初步认为Pseudomonassp.Y2-1-1是一株新的好氧反硝化菌.图6表3参12关键词　呼吸抑制剂;好氧反硝化;硝酸盐还原酶;napACLC　X172ANEWSCREENINGMETHODFORAEROBICDENITRIFICATIONBACTERIAANDISOLATIONOFANOVELSTRAIN*KONGQingxin1,2,LIJunwen1**,WANGXinwei1,JINMin1＆GUChangqing1(1InstituteofHealthandEnvironmentalMedicine,AcademyofMilitaryMedicalSciences,Tianjin　300050,China)(2HangzhouCentreforDiseaseControlandPrevention,Hangzhou　310006,China)Abstract　AnaerobicbacteriumY2-1-1,enrichedbyinte