生物硝化池污水中硝化细菌的快速定量研究_明镇寰

研究简报　文章编号:0253-2468(2002)-06-0796-03　　　中图分类号:X703.1　　　文献标识码:A生物硝化池污水中硝化细菌的快速定量研究明镇寰,岳春梅　(浙江大学生命科学学院,杭州　310012)摘要:实验采用聚合酶链式反应(PCR)技术与最大几率数法(MPN)相结合的MPN-PCR法对生物硝化池污水中的硝化细菌进行快速定量.所用的一对PCR引物是在对硝化细菌的16SrRNA基因进行系统比较的基础上设计合成的,可以扩增出大小为388bp的DNA片段.以从生物硝化池污水中抽提的含硝化细菌DNA的混合DNA为模板,进行PCR扩增并确定合适的扩增条件.运用MPN-PCR法进行定量检测的整个过程可在几小时之内完成.关键词:硝化细菌;污水;MPN-PCR法;定量检测StudyonfastquantitativedetectionforNitrobacteriainwastewaterofbi-ologicalnitrificationstageMINGZhenhuan,YUEChunmei　(CollegeofLifeScience,ZhejiangUniversityHangzhou,310012)Abstract:TheMPN-PCRmethod,basedonthecombinationofpolymerasechainreactionwithmostprobablenumber,wasappliedforquantita-tivedetectionofNitrobacteriainwastewaterofbiologicalnitrificationstage.Theoligonucleotideprimers,designedbycomparingthetotal16-SrRNAgenesequencesofNitrobacteria,wereusedtogeneratea388bpDNAfragment.ThemixedDNA(withtheNitrobacteriaDNAfromthewastewaterinthebiologicalnitrificationstage)ServedastemplateforPCRandthebestamplificationconditionwasdetermined.IttookonlyseveralhourstocountNitrobacteriabyMPN-PCRprocedure.BycomparingtheresultsofMPN-PCRwiththatofMPN-Griess,itwasfoundthatMPN-PCRcansensitively,consistently,efficientlyandrapidlyassay,whichiseffectivetodetectandcounttheNitrobacteriainthewastewaterofthebiologicalnitrificationstage.Keywords:Nitrobacteria;wastewater;MPN-PCRassay;quantitativedetection收稿日期:2002-02-11;修订日期:2002-05-10资助项目:浙江省科技厅重点项目(001103172)和浙江省环保局项目资助作者简介:明镇寰(1944—),男,副教授氨氮含量是污水处理中的一项重要指标.硝化反应是将氨氮从污水中除去的第一步关键反应,是进行污水处理的生物硝化池运行的基础.为了提高硝化效率,必须提高池