焦化废水污泥中苯系物降解优势混合菌群筛选驯化_彭淑婧

焦化废水污泥中苯系物降解优势混合菌群筛选驯化摘要:前期实验中，纯菌种挂膜生物滴滤反应器去除甲苯长期运行过程中，电镜扫描照片可以看出填料表面及断面除原始挂膜菌种外，同时存在丝状菌、芽孢杆菌等。通过取焦化厂废水处理活性污泥作为菌源，按常规方法对细菌进行筛选、分离；以甲苯浓度为控制指标，研究优势混合菌群对苯系物的联合降解效果。关键词:焦化废水；优势菌群；联合降解中图分类号:X703.1文献标识码:A文章编号:1008-8725（2011）10-0185-03ScreeningandDomesticationofBenzeneSeriesDominantBacteriainCokingSewageSludgePENGShu-jing,LIJian,LIUJia,LIUChun-jing,LIChao,JINYu-quan（CollegeofEnvironmentalandEnergyEngineering,BeijingUniversityofTechnology,Beijing100024,China）Abstract:Theearlyremovaltoluenebycross-flowbio-tricklingfilterexperimentresultsshowsthatfilamentousbacteriaandbacillusgrewonthesurfaceofcarrierstogetherwiththeoriginalbacteriaprovidedafteralongtermoperation.Mixedbacteriawithtoluenedegradationabilityareisolatedfromcokingsewagesludge,theconcentrationoftolueneasthecontroltargets,thejointdegradationefficiencyofbenzenebymixeddominantbacteriawasstudied.Keywords:cokingsewage;dominantbacteria;jointdegradation收稿日期:2011-01-25;修订日期:2011-07-07基金项目：北京工业大学青年科研基金项目（00500054K4006）；北京工业大学博士科研启动基金项目（X0005013200901）作者简介:彭淑婧（1981-），女，河北衡水人，北京工业大学在读博士研究生，主要从事大气污染控制工程研究工作。彭淑婧，李坚，刘佳，刘春敬，李超，金毓峑0引言有机物的降解过程比较复杂，在生物滴滤反应器运行过程中，即使是采用纯菌种挂膜启动方式，其微生物群落结构也会随运行条件和塔内微环境的改变而变化，并表现出不同的代谢特性[1]。混合菌株之间存在协同作用，好氧菌之间、厌氧菌之间、细菌之间、细菌和真菌之间。这种协同作用、共生机制可以彼此提供其所需的生长因子、能利用的碳源、消除有毒中间产物等，最终在反应器内构成了一个完整的微生物系统[2,3]。焦化废水成分较为复杂，包含大量苯、酚类有毒物质，以及其它含苯环的方向类化合物和杂环化合物[4]。其生化处理过程中的活性污泥中存在的微生物长期处于富含苯系物的复杂环境中，经过了自然选择和进化，有利于筛选出苯系物的优势降解菌种。为考察混合菌的联合降解效果，本实验选用焦化厂污泥作为菌源，以甲苯为底物，好氧条件下驯化、筛选和分离优势菌群。1材料与方法1.1菌种来源取焦化厂活性污泥，黑褐色，显微镜观察上清液中有菌胶团的存在，pH为7.5～7.8。混合搅拌后加入自来水淘洗3～5次，排上清液，然后加入一定量的水形成活性污泥混合液，空曝24h，1.2培养基（1）无碳源液体培养基（MS）：硫酸镁0.1g，氯化钙0.02g，磷酸二氢钾0.68g，硫酸锰0.03g，磷酸氢二钾1.73g，硫酸铁0.03g，硝酸铵1.0g加入蒸馏水稀释至1L，pH值调整至7.0～7.2。经高压蒸汽灭菌，无菌分装后放入冰箱中密封保存。（2）无碳源固态培养基：为上述MS加入20g琼脂，加热搅拌均匀，高压蒸汽灭菌，无菌环境下分装。（3）活化富集培养基（LA）：牛肉膏5.0g，蛋白胨10g，NaCl5g，水1000mL，高压灭菌后放入冰箱密封保存。（4）分离保存培养基（LB）：牛肉膏5.0g，蛋白胨10g，NaCl5g，水1000mL，琼脂2.0%，1.3污泥的曝气培养利用间歇曝气培养方式培养。每天曝气20h，静止4h。曝气时水中溶解氧保持在4mg/L左右。每天用营养液更换一定量的污泥上清夜，更换比例为75％左右。加入无碳源液体培养基，控制pH值在7～8之间，并用显微镜观察原生动物的活性。培养过程开始时，混合液中的菌胶团个体很小，并存在少量的（北京工业大学环境与能源工程