焦化废水中降解酚优势菌漆酶活性研究_王英伟

第35卷第4期2010年4月环境科学与管理ENVIRONMENTALSCIENCEANDMANAGEMENTVol.35No.4Apr.2010收稿日期:2009-11-20作者简介:王英伟(1968-),男,副教授,主要从事环境影响评价研究工作。文章编号:1674-6139(2010)04-0078-03焦化废水中降解酚优势菌漆酶活性研究王英伟1,王双1,廉守山2(1.东北林业大学,黑龙江哈尔滨150040;2.吉林森工集团三岔子林业局,吉林白山134702)摘要:本实验选取哈依煤气反应器内的活性污泥沉降物作为菌源,以邻甲基酚做为唯一碳源,分离纯化得菌株Enterobactersp.j11,测定酚浓度、温度、pH值及同酚浓度下的时间变化对于菌株产漆酶活性的影响。结果表明:温度35℃～40℃、pH6.5～7.5、酚800mg/L条件下菌株生长状态佳,酶活性高;酚浓度一定800mg/L时,测定了24h内漆酶随时间的变化,得知菌株8h后即适应高酚条件。说明该菌株适应能力强、产漆酶稳定。关键词:焦化废水;酚;漆酶活性中图分类号:X703文献标识码:AResearchofLaccasesActivityGeneratedfromDegradingPhenolPredominantBacteriainCokingWastewaterWangYingwei1,WangShuang1,LianShoushan2(1.NortheastForestryUniversity,Harbin150040,China;2.JilinForestEngineeringGroupSanchaziForestryBureau,Baishan134702,China)Abstract:TheexperimentalbacteriawascamefromHarbingasfactorybiologicalsystem.TheO-methylphenolwastheonlycarbonresourceinsubstrat.Thoughspererating,theexperimentgotEnterobactersp.j11.Thenthefittestconditionsofproducinglaccaseweremeasuredbymoculatingphenol,temperatureandpH.Theeffectoftimeonthelaccasein24hwasmearsuredatthesamephenolconcentration800mg/L.Theresultsshowthatwhenthetemperatureat35℃～40℃,pH6.5～7.5andphenol800mg/L,itcouldproducedmorelaccase;whenphenolwas800mg/L,laccaseofEnterobactersp.j11wasincreasingafterrecove-ring8h,theadaptabilityandlaccasestabilityofthisstrainwasgood.Keywords:cokingwastewater;phenol;laccaseactivity漆酶(Laccase,E.C.1.10.3.1)是一种多铜过氧化酶,它通过获得O2催化邻对苯二酚、多酚、对苯二胺、抗坏血酸等物质的氧化,使之生成相应的苯醌和水。近年来,人们发现它在造纸、染料、煤气焦化废水处理等工业上有着广阔的应用前景,因而对它的研究也越来越备受关注。焦化废水成分复杂,含有NH3-N、酚、氰等多种芳香族化合物,而且污染物浓度均较高,其中酚浓度可高达1700mg/L～2300mg/L。酚类化合物是一种原生质毒物,可使蛋白质凝固,当水中的含酚量超过4mg/L～15mg/L时,便可引起鱼类的大量死亡,如果人长期饮用被酚污染的水则会引起头晕、贫血及各种神经系统病症。本实验是利用微生物法分离出降解焦化废水中酚的优势菌并用分光光度法对其漆酶活性进行研究,这为工业化处理焦化废水中的酚提供了参考数据。[1-4]1材料与方法1.1菌源取自哈依煤气反应器内的活性污泥沉降物。1.2培养基分离用培养基(Ⅰ):牛肉膏5g,蛋白胨10g,氯化钠5g,琼脂20g,水1000ml,调节pH=7.0～7.2,121℃下高压蒸汽灭菌20min。培养基A:牛肉膏5g,蛋白胨10g,氯化钠5g,水1000ml,加入三羟基苯甲酸,使酚浓度达到800mg/L,调节pH=7.0～7.2,121℃下高压蒸汽灭菌20min。测试用培养基(Ⅱ):分离用培养基Ⅰ中不加琼脂。·78·第35卷第4期2010年4月王英伟等·焦化废水中降解酚优势菌漆酶活性研究Vol.35No.4Apr.20101.