第5节-色谱分离法

第九章第九章第五节第五节色谱分离法色谱分离法第五节第五节色谱分离法色谱分离法色谱分离法色谱分离法，又称层析分离法或色层分离法又称层析分离法或色层分离法。根据分离过程的机理根据分离过程的机理，可将色谱分离法分为分配可将色谱分离法分为分配、吸附吸附、离子交换和凝胶色谱法等类型离子交换和凝胶色谱法等类型。按流动相的状态不同按流动相的状态不同，可将色谱分离法分为：可将色谱分离法分为：气相色谱和液相色谱法；气相色谱和液相色谱法；按固定相的形式不同按固定相的形式不同，又可将色谱分离法分为：又可将色谱分离法分为：柱色谱柱色谱、平面色谱法平面色谱法。第九章第九章第五节第五节色谱分离法色谱分离法一、纸色谱（一、纸色谱（PCPC）法）法纸色谱法以滤纸作为载体纸色谱法以滤纸作为载体，利用纸中吸附的水分利用纸中吸附的水分（约为滤纸自身质量的约为滤纸自身质量的2020％）作固定相作固定相，通常选用一种通常选用一种溶剂或多种溶剂的混合溶液作流动相溶剂或多种溶剂的混合溶液作流动相（亦称展开剂亦称展开剂）。鉴于构成固定相的成分以水为主鉴于构成固定相的成分以水为主（不妨将其理解为固定不妨将其理解为固定液），实质上分离的机理也就相当于待测物质在水相实质上分离的机理也就相当于待测物质在水相、有机相间的分配有机相间的分配，因此该方法又称为纸上萃取分离法因此该方法又称为纸上萃取分离法。分离后各物质的斑点自身具有颜色或另通过蒸汽熏分离后各物质的斑点自身具有颜色或另通过蒸汽熏、喷显色剂使其显色喷显色剂使其显色。第九章第九章第五节第五节色谱分离法色谱分离法二、薄层色谱（二、薄层色谱（TLCTLC）法）法它通常是在一块平滑玻璃板上均匀地涂布一层吸附它通常是在一块平滑玻璃板上均匀地涂布一层吸附剂（如硅胶、氧化铝、硅藻土等）作为固定相，并将层剂（如硅胶、氧化铝、硅藻土等）作为固定相，并将层析板斜靠在层析缸析板斜靠在层析缸(筒)中进行的层析分离。中进行的层析分离。在薄层色谱分离过程中，促使流动相（展开剂）移在薄层色谱分离过程中，促使流动相（展开剂）移动的动力仍然是毛细作用，当展开剂沿着吸附剂薄层向动的动力仍然是毛细作用，当展开剂沿着吸附剂薄层向上迁移时，待分离物质在固定相和流动相间便发生吸附、上迁移时，待分离物质在固定相和流动相间便发生吸附、溶解、再吸附、再溶解的物理化学过程。溶解、再吸附、再溶解的物理化学过程。由于固定相和流动相对待分离物质的吸附（或溶解）由于固定相和流动相对待分离物质的吸附（或溶解）能力不同，使得不同待测物质在两相中的移动速率也不能力不同，使得不同待测物质在两相中的移动速率也不相同：易被固定相吸附的物质移动速率慢、难以吸附的相同：易被固定相吸附的物质移动速率慢、难以吸附的物质移动速率快，从而形成彼此分开的斑点。物质移动速率快，从而形成彼此分开的斑点。第九章第九章第五节第五节色谱分离法色谱分离法三、色谱分离操作与定性定量方法三、色谱分离操作与定性定量方法色谱分离法试样加入的方式色谱分离法试样加入的方式，是用毛细管是用毛细管（或微量或微量注射器注射器）将待分离物质或标准样品的溶液将待分离物质或标准样品的溶液，点在专用纸点在专用纸（板）底部的同一条线上底部的同一条线上，加载样品的地方称为原点加载样品的地方称为原点。加样前加样前，通常在专用纸通常在专用纸（板）上用铅笔标记原点的位置；上用铅笔标记原点的位置；加样后加样后，一般需将试样中的溶剂蒸发以后一般需将试样中的溶剂蒸发以后，再将专用纸再将专用纸（板）置于展开容器中进行展开置于展开容器中进行展开。当展开剂迁移至接近当展开剂迁移至接近专用纸专用纸（板）的上端时的上端时，即可停止分离操作即可停止分离操作，取出层析取出层析纸（板），并标记溶剂前沿的位置并标记溶剂前沿的位置。第九章第九章第五节第五节色谱分离法色谱分离法半定量分析，通过对照分离后组分的斑点与标准物半定量分析，通过对照分离后组分的斑点与标准物质的斑点来进行，常用的方法是比较对应斑点的面积大质的斑点来进行，常用的方法是比较对应斑点的面积大小和斑点的颜色深浅。小和斑点的颜色深浅。定量分析，可将滤纸上的斑点裁下或将玻璃板上薄定量分析，可将滤纸上的斑点裁下或将玻璃板上薄层中的斑点刮下，用适当的溶剂将其溶解后，再选择适层中的斑点刮下，用适当的溶剂将其溶解后，再选择适当的化学定量分析方法或仪器分析方法进行测定。当的化学定量分析方法或仪器分析方法进行测定。也可采用专用的薄层色谱分析仪器直接定量分析。也可采用专用的薄层色谱分析仪器直接定量分析。第九章第九章阅读材料阅读材料超临界流体萃取超临界流体萃取该方法是利用超临界流体作为萃取剂的一种萃取分该方法是利用超临界流体作为萃取剂的一种萃取分离方法。所谓的超临界流体是指某物质的温度和压力处离方法。所谓的超临界流体是指某物质的温度和压力处