反相高效液相色谱法测定大青叶中邻氨基苯甲酸与丁香酸的含量_王文清

·药品质量控制·反相高效液相色谱法测定大青叶中邻氨基苯甲酸与丁香酸的含量＊王文清,张飞,方建国,李园园,汪秋兰,汤杰(华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部,武汉430030)[摘要]目的建立测定大青叶中邻氨基苯甲酸和丁香酸含量的反相高效液相色谱法。方法固定相:LichrosorbC18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水-磷酸(18∶82∶0.3);检测波长:272nm;流速:0.8mL·min-1;柱温:30℃;进样体积:10μL。结果邻氨基苯甲酸、丁香酸分别在12.7～127.0和5.10～51.0μg·mL-1浓度范围内线性关系良好;邻氨基苯甲酸的平均回收率为98.7%(RSD=1.0%);丁香酸的平均回收率为99.0%(RSD=1.2%)。结论该方法灵敏、快速,准确可靠。[关键词]大青叶;邻氨基苯甲酸;丁香酸;反相高效液相色谱法[中图分类号]R927.2;R286[文献标识码]A[文章编号]1004-0781(2006)05-0456-02DeterminationofAnthranilicAcidandSyringicAcidinFoliumIsatidisbyRP-HPLCWANGWen-qing,ZHANGFei,FANGJian-guo,LIYuan-yuan,WANGQiu-lan,TANGJie(DepartmentofPharmacy,TongjiHospitalAffiliatedwiththeTongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030,China)ABSTRACTObjectiveToestablishaRP-HPLCmethodtodeterminethecontentsofanthranilicacidandsyringicacidinFoliumIsatidis.MethodsChromatographywascarriedoutonaLichrosorbC18column(4.6mm×150mm,5μm);mobilephase:acetonitrile-water-phosphoricacid(18∶82∶0.3);flowrate:0.8mL·min-1;columntemperature:30℃,samplevolume:10μL;andthedetectionwavelengthwas272nm.ResultsAgoodlinearityofanthranilicacidwasobtainedwithin12.7-127.0μg·mL-1andsyringicacidwaswithin5.10-51.0μg·mL-1.Theaveragerecoveriesofanthranilicacidwas98.7%(RSD=1.0%);andsyringicacidwas99.0%(RSD=1.2%),respectively.ConclusionThemethodissensitive,rapid,andaccurate.KEYWORDSFoliumIsatidis;Anthranilicacid;Syringicacid;RP-HPLC大青叶系十字花科菘蓝属植物菘蓝IsatisIndigo-ticaFort.的干燥叶,性寒味苦,具有清热解毒、凉血消肿之功效。药理研究表明,大青叶主要有抗病毒、抗细菌内毒素、抗菌、抗肿瘤和免疫调节等功能[1]。其抗内毒素作用日益引起研究者的重视。本课题组曾发现邻氨基苯甲酸和丁香酸具有明显的抗内毒素活性[2,3]。笔者在本实验中建立了反相高效液相色谱法测定大青叶中邻氨基苯甲酸和丁香酸含量的方法。该方法操作简便、准确,重复性好。1仪器与试药美国Agilent1100型高效液相色谱仪,7725i定量[收稿日期]2005-05-12[修回日期]2005-06-20[基金项目]＊国家自然科学基金资助项目(基金编号:39800193)[作者简介]王文清(1969-),女,四川遂宁人,主管药师,在读博士,主要从事中药有效成分活性评价与药物分析研究工作。电话:027-83649095。阀,可变波长紫外检测器;UV-265FW型分光光度计(日本岛津);AUW220D型双量程分析天平。甲醇为色谱纯,磷酸为分析纯,水为多效纯化水。邻氨基苯甲酸(批号:20020510,购自湘中地质实验研究所,面积归一化法测得纯度为99.3%),丁香酸(批号:S6881-5G,供含量测定用,购自德国Sigma公司),大青叶(定点种植并采集于安徽亳州,经华中科技大学同济医学院方建国教授鉴定为十字花科植物菘蓝IsatisIndigoticaFort.的干燥叶)。2方法与结果2.