紫外分光光度法测定香兰素的含量的国际标准ISO5565_2_1999_部分_

©1994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net法规·标准紫外分光光度法测定香兰素的含量的国际标准ISO5565-2:1999(部分)收稿日期:2003-02-101范围本国示标准ISO5565第二部分规定了墨西哥香荚兰[VanillaFragrans(Salisbury)Ames]的分析检测方法。本国际标准ISO5565第二部分适用于块状或粉状的香荚兰豆荚、香荚兰切段,但不适用于香荚兰提取物。本国际标准ISO5565第二部分介绍了紫外分光光度法测定香兰素含量的方法。注:香荚兰的规格已在ISO5565-1中作了说明。2参照标准本文引用的标准所包括的条文组成了本国际标准ISO5565的条文,对于以前的参考,以及后来修改和补充发行的版本都不适用。欢迎各方人士对本国际标准ISO5565的最新版本条文的适用性进行调查。对于现行参考标准,最新版本的条文已进行引用。ISO和IEC成员保留对现行国际标准的解释权。ISO1042:实验室玻璃制品———单标容量瓶。3定义本标准采用上述定义。含水量:是采用本国际标准ISO5565第二部分所规定的方法夹带和收集的水量。注:通常用质量百分比来表示[%(m/m)]。4检测方法紫外分光光度法测定块状或粉状的香荚兰、豆荚、香荚兰切段中香兰素的含量4.1原理试样中所含的香兰素用乙醇萃取。用分光光度法测定乙醇溶液中香兰素的含量。4.2试剂所用试剂均应为确认的分析纯试剂,使用的水应为蒸馏水或纯度与之相当的水。4.2.1乙醇:96%(V/V),用于紫外分光光度法。4.2.2氢氧化钠溶液:c(NaOH≈1mol/l)。4.2.3香兰素(4-羟基-3-甲氧基苯甲醛)。4.3仪器常用的实验室设备及下列设备:4.3.1气密磨4.3.2单标容量瓶:容量为100ml,250ml,应符合ISO1042的要求。4.3.3移液管:10、20和25ml三种规格。4.3.4干燥器:内盛有效的干燥剂。4.3.5连续抽提取器:索氏,由以下构成:4.3.5.1索氏抽提器:容量为125ml。4.3.5.2冷凝器。4.3.5.3烧瓶,250ml,磨口.4.3.5.4柱子套件。4.3.5.5热源:电热套或者油浴,由带有调温断路器的滑动可变电阻器或者其它热控装置控制。4.3.6分光光度计:适于在紫外光谱区进行测定。4.3.7石英池:作分光光度测定时用,光径长度1cm。4.3.8称量瓶:配备有密封瓶塞,容量为25ml。4.3.9进样器:高效液相色谱用。4.3.10分析天平:精确到0.001g。4.4操作步骤4.4.1香兰素比吸光度的测定4.4.1.1标准溶液的制备用称量瓶(4.3.8)称取预先在干燥器(4.3.4)—04—No.2FLAVOURFRAGRANCECOSMCTICSApril,2003www.ffc2journal.com©1994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net中干燥的香兰素(4.2.3)约30mg,精确至0.001g,加约20ml乙醇(4.2.1)溶解,定量移入250ml容量瓶(4.3.2)中,用乙醇洗涤称量瓶数次,将洗液倒入容量瓶,用乙醇稀释至刻度并混匀(溶液A1)。用移液管吸取25ml溶液A1于100ml容量瓶(4.3.2)中,加乙醇至刻度并混匀(溶液B1)。用移液管吸取10ml溶液B1于100ml容量瓶中,加约60ml乙醇和2ml氢氧化钠溶液(4.2.2),混匀。用乙醇稀释至刻度并混匀(溶液C1)。4.4.1.2参比溶液的配制用移液管吸取2ml氢氧化钠溶液(4.2.2)于100ml容量瓶中,用乙醇稀释至刻度并混匀。4.4.1.3测定用分光光度计(4.3.6)和石英池(4.3.7),在250-420nm波长范围内记录相对于参比溶液的溶液C1的光谱。4.4.1.4计算最大吸收出现在波长为350±3nm处,其吸光度应在0.2至0.8之间。从约270nm到380nm处划一条基线。记录最大吸光度(Amax)和在相同波长下基线的吸光度Abase。按下列公式计算香兰素的比吸光度(E1cm1%):E1cm1%=100(Amax-Abase)m式中:m为用于制备溶液的香兰素的质量,以毫克计。4.4.2试样制备4.4.2.1香荚兰豆荚、香荚兰切段或块。将试样磨碎,混匀。4.4.2.2香兰荚粉将试样混匀。4.4.3测试样品称取约20g(4.4.2.1或4.4.2.2)样品,精确至0.001g。4.4.4抽提用约200ml乙醇(4.2.1)在抽提器(4.3.5)中抽提测试样品