中国淡水绿藻纲新记录属——麦可属(Mychonastes)

第37卷第3期2013年5月水生生物学报AC1lAHYDROB10L0GICASINICAVo1．37，NO．3May，2013doi：10．7541／2013．46中国淡水绿藻纲新记录属——麦可属(Mychonastes)李艳晖，2胡明明，2沈银武刘永定李敦海李根保(1．中国科学院水生生物研究所，武汉430072；2．中国科学院大学，北京100049)摘要：从我国滇池分离、培养获得2株超微真核藻，对其进行形态学、细胞超微结构和18SrRNA基因序列分析。结果表明：藻株在细胞形态、结构和繁殖方式具麦可属(MychonastesSimpson&VanValkenburg)特征，细胞壁2层，外层细胞壁表面具不规则肋网和典型的暗．明．暗结构；具备一套简单的细胞器，包括细胞核、不具蛋白核的叶绿体和线粒体各1个，叶绿体周生、杯状，占据细胞大部分体积；以似亲孢子方式繁殖。结合18SrRNA序列分析，将其归为麦可属，属于绿藻纲、绿藻门，是该属在我国淡水湖泊的首次描述。关键词：绿藻纲；麦可属；中国新记录中图分类号：Q949．21文献标识码：A文章编号：1000—3207(2013)03—0473—08超微浮游植物(Picophytoplankton，<3rtm)广泛分布于各种类型和不同营养水平的湖泊中，是水体的重要初级生产者ll，，包括超微蓝藻(Picocyano．bacteria)和超微真核藻(Eukaryoticpicoalgae)。一般来说，典型的真核超微浮游生物的特征为：细胞球状，形态简单，以似亲孢子或二分裂营无性生殖f3]。由于其细胞较小，形态特征简单，使用普通光学显微镜甚至电子显微镜观察也很难鉴定到纲水平【4】，因此常被描述为“Smallcoccoid或Chlorella．1ikecells；littleroundgreenballs”(LRGT)或Nanno—chloris．1ikealgae”ll，，导致了对这类藻进行分类学描述和鉴定上的困难，同时也人为降低了其在自然水体中的多样性。目前，国外已报道的常见淡水真核超微藻种类主要有：Chorieystisminor(Skuja1Fott~卜、Pseudo—dictyosphaeriumjurisii(Hind~ik)Hin&ik、Mychonasteshomosphaera(Skuja)Kakina&Punochaovao，l1]、NannochloropsislimneticaKrienit，Hepperle，Stich&Weiler[，]，欧洲、北美、以色列等都有超微浮游植物分离、形态学、超微结构和系统发育方面的报道。我国尚未有关于淡水超微真核浮游植物的分布和多样性方面的研究，最新的藻类分类学资料《中国淡水藻类一系统、分类及生态》[131中也没有关于超微真核藻属和种的描述。作者于2006年自滇池分离获得2株单种真核超微藻，对其进行了形态学、细胞超微结构特征观察，同时结合18SrRNA基因序列构建系统发育树确定其分类学地位，填补我国淡水真核超微浮游植物分类学研究方面的空白。1材料与方法1．1藻株的分离与培养取一定体积新鲜采集的水样预过WhatmanGF／C玻璃纤维滤膜或Whatman2．0gm孑L径的聚碳酸酯膜，取过滤水样(或原水样)划平板或铺平板接种于含1％琼脂的BG11f¨或BBM[1固体培养基，用封KI膜封好后将其倒置于光照培养箱内，于20—30gmolphotons／(m2．s1、光暗周期12h：12h、温度(25+1)℃条件下培养，待平板上长出可见藻落，挑取单藻落进行镜检，进一步分离纯化目的藻落，挑单藻落至BG11液体培养基，于相同条件下培养。获得藻株DC．10和DC．11(分别于2006年7月和2006年10月分离自滇池水样)。1．2形态学和细胞超微结构观察取培养至指数生长阶段的藻细胞进行光镜及电收稿日期：2012-05—12；修订日期：2012—09．12基金项目：水体污染控制与治理科技重大专项(2008ZX07105—006，2008ZX07102—005，2009ZX07101—011-03)资助作者简介：李艳晖(1977一)，女，山西人；博士；主要从事藻类生理生态影响方面的研究。E—mail：liyh7822@163．tom通信作者：刘永定，研究员；E．mail：liuyd@ihb．ac．cn；李根保，E—mail：ligb@ihb．ac．ca474水生生物学报37卷镜的样品制备。分别用生物显微镜(NikonECLIPSEE600)、扫描电镜(荷兰FEI公司的Quanta200)和透射电镜(日本JEOL公司的JEM．1230)观察。1．3藻细胞基因组DNA提取方法参照《精编分子生物学实验指南》(第四版)【】。取适量体积指数生长期的藻液，于20℃，12000r