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基于流式细胞技术的铜绿微囊藻自动识别参数筛选方法研究

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文档简介:

第4O卷第3期2015年3月环境科学与管理ENⅥRoNMENTALSCⅢNCEANDⅣ【ANAGEMENTVo1.40Nn3Mar.2015文章编号:1674-6139(2015)03-0039-06基于流式细胞技术的铜绿微囊藻自动识别参数筛选方法研究康丽娟,孙从军(上海市环境科学研究院,上海200233)摘要:微囊藻的快速定量研究是水华预防与控制的重要研究内容,本研究基于浮游植物流式细胞仪,探讨了铜绿微囊藻特征指标体系建立的方法。研究发现FLRedAverage为将藻细胞与培养体系中杂质有效区分的最重要的指标。通过与显微计数和蛋白核小球藻的重复试验验证了该指标的有效性。在此基础上,以蛋白核小球藻为干扰信号,探讨了铜绿微囊藻特征指标建立的方法。结果表明,红色荧光信号均值(FLRedAverage)为铜绿微囊藻最重要的特征指标,能实现铜绿微囊藻与杂质信号和蛋白核小球藻的有效区分。为兼顾准确与效率,结合指标的生理意义与数学特征,建议FLRedAverage、SWSAverage与FLOrangeAverage为铜绿微囊藻特征指标,相应的取值范围为1.39mv~17.72mv、22.05mv一781.15my和0.43mv一1.84mv。关键词:铜绿微囊藻;蛋白核小球;指标筛选;流式细胞中图分类号:)(52文献标志码:AAutomaticIndexScreeningMethodofMicrocystis.AemginosaBasedonFlowCytometerKangLijuan,SunCongjun(ShanghaiAcademyofEnvironmentalSciences,Shanghai200233,China)Abstract:Thispaperisaimedtostudythemethodforscreeningcharacteristicindexsystemofmierocystisaeruginosausingphy—toplanktonflowcytometer.Firstofal1.thisstudyscreenedtoseparatealgaecellsandimpurities.Thestudyf0undthatFLRedAver-agewasthemostimportantindicator.Thenchlorellapyrenoidosawasaddedasinterferencesignal,theresultsshowedthatFLRedAverage,SWSAverageandFLOrangeAveragewereeffectiveindexwithvaluesof1.39~17.72mv,22.05~781.15mvand0.43~1.84mv,respectively.Itsuggestedthatthedistinctionbetweenmierocystisaeruginosaandchlorellapyrenoidosacanbemadeby3indicatorsunderphysiologicalsignificance.Keywords:microcystisaeruginosa;chlorellapyrenoidosa;indexidentification;flowcytometer微囊藻是中国富营养化水体中最常见的水华藻类,其形成的毒素及异味物质影响生态环境安全,威胁人类健康,因此,微囊藻的研究成为了水华控制及富营养化研究的重要内容。建立快速、准确的检测方法是浮游植物监测的基础和关键。收稿日期:2015—02—04基金项目:上海市环科院创新基金(CX201201)作者简介:康丽娟(1979一),女,博士,高级工程师,研究方向:浮游植物生理生态,主要从事水污染控制研究工作。传统的显微计数法分析速度慢、耗时长,对操作人员的要求较高,难以满足浮游植物种群动力学观测量大、连续的要求。随着技术的发展,不同的方法手段逐步应用到浮游植物检测电,其中流式细胞技术由于能够成功实现不同门类单细胞藻类的快速定量分析,受到了研究者的关注⋯。要实现藻细胞的快速识别首先需要解决的一个问题是确定特征指标,基于浮游植物流式细胞仪,本研究以铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa)为材料,就铜绿.39·期康丽娟等·基于流式细胞技术的铜绿微囊藻自动识别参数筛选方法研究Vo1.40NO.3Mar.2015微囊藻特征指标筛选、指标的合理性检验等进行了探讨。结合待选指标物理与生理意义,运用数学方法,对指标逐一进行分析,并以蛋白核小球藻(Chlorellapyrenoidosa)为干扰信号,探讨了铜绿微囊藻特征指标体系建立的方法,旨在建立一个具有代表性、可验证、可量化的指标体系,为铜绿微囊藻的快速检测提

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