有毒甲藻细胞密度测定方法的比较研究

148广东农业科学2012年第2l期有毒甲藻细胞密度测定方法的比较研究曾玲，龙丽娟一，梁计林，龙超。(1．湛江师范学院化学科学与技术学院，广东湛江524048；2．中国科学院南海海洋研究所／中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室／广东省海洋药物重点实验室，广东广州510301)摘要：采用显微镜计数法、荧光分光光度法、叶绿素a含量测定法、可见分光光度法对利玛原甲藻(Prorocentrumlima)指数生长期不同浓度的培养液进行细胞密度测定。结果表明，后3种细胞计数方法与显微镜计数法相比较，均有较好的线性关系；同时对不同生长期的利玛原甲藻培养液进行测定，结果表明，4种方法的生长曲线一致性良好。比较分析发现，可见分光光度法适用于不同细胞密度范围的测定，操作简单、耗时短、不需要破坏样品、适于批量操作，可确定为便捷、有效、可行的利玛原甲藻细胞计数法。关键词：利玛原甲藻；细胞计数法；生长曲线中图分类号：$968．4文献标识码：A文章编号：1004—874X(2012)21—0148—03ComparativestudyoncellcountingmethodwithtoxicdinoflagellateProrocentrum跣口ZENGLingr，LONGLi-juan，LIANGJi-lin，LONGChao。(1．ChemistryScienceandTechnologySchool，ZhanjiangNormalUniversity,Zhanjicmg524048，China；2．KeyLaboratoryofMarineBio—resourcesSustainableUtilization／GuangdongKeyLaboratoryofMarineMateriaMedicaSouthChinaSeaInstituteofOceanology，ChineseAcademyofSciences，Guangzhou510301，China)Abstract：Inthisstudy，fourcell-countingmethodsofmicroscope，FluorescenceSpeetrophotography，VisibleSpectrophotographyandChlaContainingMeasurementwereusedtomeasuretheamountoftheexponentialphasecellofProrocentrumfima．Theinsigh}tfulcomparisonontheinterrelationsofthelastthreementionedcellcountingmethodswasmadewiththemethodofmicroscope．theresuhsrevealedthesound1inearinterrelationsamongthem．DifferentgrowthphaseofPfimaweresimultaneouslymeasured．andthengrowthcurvesweredrewbasisonthedatafromdifferentmethods．Theresultsshowedgoodconcordancebetweenthesemeasurementmethods．Particularly，forVisibleSpectrophotographyMethods，theoperatingproceduresweresimple，fast，suitableforwidecell—densityranges，batchnleasurelnentsandthetestsampleceilswerenotdestructedandcouldbereusedforfurtherresearchaftermeasurement．Therefore．visiblespectrophotographywasconvenient．high-eficiencyandreliableapproachforcellcountingofPlima．Keywords：Prorocentrumlima；cell—countingmethod；growthcurve利玛原甲藻(Prorocentrumlima)是一种能产生毒素的底栖附生甲藻，有关研究已经证实利玛原甲藻能够产生聚醚类化合物，包括okadaicacid(OA)，dinophysistoxin一1fDTX一11、DTX一2和DTX一3，这些毒素是导致腹泻性贝毒(diarrheticshellfishpoisoning，DSP)rO毒事件发生的原因_1。利玛原甲藻是研究腹泻性贝毒生物合成机制和海洋底栖甲藻生态属性的重要模式