桑葚多糖的分离纯化及组成分析

华西药学杂志WCJ·PS2014，29(4)∶401～404作者简介:田仁君(1978—)，女，硕士，讲师，从事天然药物活性成分的分离及研究工作。Email:tianrenjun888@163．com桑葚多糖的分离纯化及组成分析田仁君(四川中医药高等专科学校，四川绵阳621000)摘要:目的探讨桑葚多糖(PMF)的分离纯化方法，研究纯化组分的组成及结构。方法首先采用DEAE－52纤维素离子交换柱进行分级洗脱纯化PMF，再用SephadexG－100葡聚糖凝胶色谱柱进一步纯化得纯化多糖;用苯酚－硫酸法测定总糖的含量、考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量、硫酸－间羟联苯法测定糖醛酸的含量、氯化钡－明胶比色法测定硫酸基的含量、糖腈乙酸酯衍生物GC法测定单糖的组成、分子排阻HPLC法测定纯度及分子量，采用IＲ法、高碘酸氧化、Smith降解分析其结构。结果经分离纯化得到PMF1、PMF2、PMF3等多糖组分;PMF1由木糖、半乳糖组成，其摩尔百分比分别为3．26%、96．74%;PMF2仅由葡萄糖组成;PMF3由鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，其摩尔百分比分别为9．31、1．76、13．09、14．18、25.49、36．17。PMF1、PMF2、PMF3的平均分子量分别为71．69、84．33、103．17kDa，均为均一组分，具多糖的红外特征吸收峰，含糖醛酸和硫酸基，存在1→3、1→6或1→2键合吡喃己糖残基，PMF2、PMF3中存在α，β－糖苷键。结论对所纯化的桑葚多糖进行了初步的性质研究与结构分析。关键词:桑葚多糖;分离纯化;理化性质中图分类号:Ｒ28文献标志码:A文章编号:1006－0103(2014)04－0401－04DOI:10．13375/j．cnki．wcjps．2014．04．015Separation，purificationandcompositionanalysisofpolysaccharidesfromMorifructusTIANＲen－jun(SichuanCollegeofTraditionalChineseMedicine，Mianyang，Sichuan，621000P．Ｒ．China)Abstract:OBJECTIVEToexplorethemethodsforseparationandpurificationofpolysaccharidesfromMorifructus(PMF)，andinvestigatecompositionandstructureofthepolysaccharides．METHODSThecrudePMFwaspurifiedbyDEAE－52ionexchangecolumnchromatographyandfurtherpurifiedthroughaSephadexG－100columntoaffordthepurifiedpolysaccharide．Thecontentoftotalcarbohydrate，protein，uronicacidandsulfuricradicalweremeasuredbythemethodofsulfuricacid－phenolcoloration，coomass-iebrilliantbluecoloration，sulfate－3－Phenylphenylolassay，gelatin－bariumchlorideassay，respectively．Thecompositionofmono-saccharidewasinvestigatedbyusingthemethodofSugarandacrylicacidesterderivativesofgaschromatography．TherelativemolecularweightwasdeterminedbyHPLC－SEC．ThestructuralcharacterizationsofthepolysaccharideswereconfirmedbyNaIO4oxidation，SmithdegradationandIＲ．ＲESULTSThreepolysaccharidesofPMF1，PMF2andPMF3wereobtainedfromcrudepolysaccharides．PMF1wascomposedofxyloseandgalactoseinamolarpercentof3．26and96．74，respectively，andPMF2wasonlycomposedofglucose．PMF3wascomposedofrhamnose，fucose，xylose，mannose，glucoseandgalactosewitha