PCR污染的产生及防治

PCR污染的产生及防治污染的产生及防治PCR实验室污染的特点实验室污染的特点•概念：由于各种原因，造成的PCR扩增体系中出现了非目的检测样本本身的模板，使得PCR结果出现假阳性。•PCR实验室的污染不同于一般生物安全实验室的污染•PCR污染总是产生假阳性结果PCR流程流程•样品准备（samplepreparation）•反应体系配置（PCRreactionassembly）•PCR反应（PCRexecution）•反应后分析（post-PCRanalysis）PCR污染的途径污染的途径•操作错误或者误差造成的样品间交差污染•PCR试剂的污染•PCR实验器材的污染•气溶胶（AmpliconAerosol）PCR污染的四种来源污染的四种来源•标本或模板间的交叉污染•PCR试剂的污染•PCR扩增产物的污染•实验室克隆质粒的污染引起引起PCR污染的原因污染的原因标本或模板间交叉污染•容器被污染容器被污染•标本或模板放置时标本或模板放置时,由于密封不严溢于容器外由于密封不严溢于容器外•容器外粘有模板而造成相互间交叉污染容器外粘有模板而造成相互间交叉污染•标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染•模板吸取过程中模板吸取过程中,因气溶胶（因气溶胶（aerosol）或其他原因引起移液器）或其他原因引起移液器污染，从而导致交叉污染污染，从而导致交叉污染•有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染导致彼此间的污染引起引起PCR污染的原因污染的原因PCR试剂污染•PCR试剂配制过程中,移液器、容器、水及其他溶液等原因造成试剂被PCR核酸模板污染。