蛋白质变性与沉淀

实验项目实验项目蛋白质变性与沉淀蛋白质变性与沉淀一、实验目的一、实验目的1.1.掌握蛋白质变性与沉淀掌握蛋白质变性与沉淀的原理及各种沉淀方法；的原理及各种沉淀方法；2.2.熟悉刻度吸量管的正确熟悉刻度吸量管的正确使用；使用；3.3.了解蛋白质变性与沉淀了解蛋白质变性与沉淀两者的关系。两者的关系。二、实验原理二、实验原理（一）（一）蛋白质沉淀原理蛋白质沉淀原理蛋白质蛋白质溶于水形成溶于水形成稳定稳定的胶体溶的胶体溶液，维持液，维持蛋白质蛋白质胶体溶液稳定因素：胶体溶液稳定因素：1.1.蛋白质蛋白质颗粒表面的颗粒表面的水化膜；水化膜；2.2.蛋白质蛋白质颗粒表面的颗粒表面的电荷。电荷。去除上述稳定因素可使蛋白质沉去除上述稳定因素可使蛋白质沉淀析出淀析出。蛋白质沉淀析出常用的方法有蛋白质沉淀析出常用的方法有等电点法、盐析法、重金属离子沉等电点法、盐析法、重金属离子沉淀法、有机酸试剂沉淀法、有机溶淀法、有机酸试剂沉淀法、有机溶剂沉淀法等。剂沉淀法等。（二）蛋白质变性原理（二）蛋白质变性原理蛋白质受某些物理或化学因蛋白质受某些物理或化学因素的影响，空间结构发生改变，素的影响，空间结构发生改变，生物活性丧失。称为蛋白质变性。生物活性丧失。称为蛋白质变性。蛋白质变性，分可逆；不可逆。蛋白质变性，分可逆；不可逆。三、实验仪器与试剂三、实验仪器与试剂1.仪器试管、刻度吸量管、洗耳球等。2.试剂5％蛋白质蛋白质溶液、溶液、2.5％蛋白质蛋白质溶液、溶液、10％ZnSO4溶液、溶液、o.1mol/LNaOH、1％三氯醋酸、无水乙醇、NaCl（固体）四、实验内容及四、实验内容及操作步骤操作步骤1.1.重金属盐及有机酸类沉淀蛋白质重金属盐及有机酸类沉淀蛋白质2.2.乙醇沉淀蛋白质乙醇沉淀蛋白质（一）实验内容（一）实验内容（二）（二）操作步骤操作步骤