一株产耐热纤维素酶菌株的筛选及酶学性质

http://www.cibj.com/应用与环境生物学报ChinJApplEnvironBiol2012，18(1):075~0792012-02-25DOI:10.3724/SP.J.1145.2012.00075纤维素酶是对纤维素原料进行利用的关键酶，是一类能水解纤维素中β-1,4-葡萄糖苷键的多组分酶系的总称，主要由外切葡聚糖苷酶（EC.3.2.1.91）、内切葡聚糖苷酶（EC.3.2.1.4）、β-葡萄糖苷酶（EC.3.2.1.21）组成，广泛存在于真菌、细菌、动植物等多种生物体内[1].目前利用微生物对纤维素进行降解产生还原糖并应用于燃料制取、食品、酿酒和饲料加工等领域越来越引起各国科研人员和生产人员的重视[2]，然而这些领域的加工过程一般都是在高温下进行，很多纤维素酶在高温催化过程中活性降低并最终失活，不再具有高效的催化活力，需要补加以再次促进酶解过程的进行，这不仅增加了工艺并且随着酶用量的增加也加大了生产成本[3~4]，所以纤维素酶的温度耐受能力在很大程度上制约着纤维素酶的应用和经济性[5~6].真菌所产生的纤维素酶多是胞外酶，便于分离和提取，且各组分较为齐全，但是耐热性比较差[7]；而大多数细菌产生的纤维素酶是胞内酶或吸附在细胞壁上，只有一部分能分泌到细胞外，虽然提取纯化难ScreeningofaThermostableCellulase-producingStrainandItsEnzymaticProperties*HANMing1,2,YUANYuexiang1,YANZhiying1,HERongna1,LIUXiaofeng1**&LIAOYinzhang1(1ChengduInstituteofBiology,ChineseAcademyofSciences,Chengdu610041,China)(2GraduateUniversityofChineseAcademyofSciences,Beijing100049,China)AbstractU�ingCMCCongoRedaga����a�e�e�hod,ana��ino�y�e�i�����ain���odu�ing�e��u�a�e�i�hhigh�e��e��a�u��eU�ingCMCCongoRedaga����a�e�e�hod,ana��ino�y�e�i�����ain���odu�ing�e��u�a�e�i�hhigh�e��e��a�u��etoleranceandpHstabilitywasisolatedfromthesamplecollectedfrommushroomplantation.Thestrainwasidentifiedandna�eda�ThermobifidafuscaDY3by�o���ho�ogi�a�,�hy�io�ogi�a�andbio�he�i�a��ha��a��e��i��i��,and16S��DNAgene�equen�eana�y�i�.The��udyon�he�e��u�a�e�ho�ed�ha��heex���a�e��u�a���he���o��ab�e�e��ua��eexhibi�ed�he�axi�u�a��ivi�ya�65℃and��e�ained�o��e�han75%ofi���axi�u�a��ivi�yaf�e��in�uba�ionfo��60�inu�e�a�70℃.Theenzy�ea��o�ho�edi���H��abi�i�ybe��een�H5.5and10.0,and��e�ained80%ofi���axi�u�enzy�a�i�a��ivi�yaf�e�����ea�eda��H10.0.The�odiu��a��boxy�e�hy��e��u�o�e�a�i��be��zy�o�y�e.A���he�ha��a��e��i��i��of�heenzy�e���ovide��efe��en�eva�uefo��i��a���i�a�ioninbio�ogi�a����e���ea��en�of�igno�e��u�o�e.Fig5,Tab1,Ref23Key�o��d��he���o��ab�e�e��u�a�e;����ain����eening;a��ino�y�e�e;�hy�ogene�i�ana�y�i�;Thermobifida;enzy�i����o�e���yCLCQ939.13+2.06:Q814.1一株产耐热纤维素酶菌株的筛选及酶学性质*韩铭1,2袁月祥1闫志英1贺蓉娜1刘晓风1**廖银章1（1中国科学院成都生物研究所成都610041）（2中国科学院研究生院北京100049）摘要采用纤维素刚果红平板法从大田蘑菇种