PCRDGGE研究处理垃圾渗滤液序批式生物膜反应器SBBR中的细菌多样性

第28卷第5期2007年5月环境科学ENVIRONMENTALSCIENCEV01．28．No．5May，2007PCR．DGGE研究处理垃圾渗滤液序批式生物膜反应器(SBBR)中的细菌多样性肖勇1，杨朝晖¨，曾光明1，马延和2，刘有胜1，王荣娟1，徐峥勇1(1．湖南大学环境科学与工程学院，长沙410082；2．中国科学院微生物研究所，北京100080)摘要：为了研究序批式生物膜反应器中的细菌多样性及其脱氮的微生物学机理，为工艺改进提供依据，从同步高效去除垃圾渗滤液中高氨氮和高cOD的sBBR生物膜和渗滤液原水中采集微生物样品并提取微生物总DNA，使用细菌通用引物对(GC341F，907R)从总DNA中成功扩增出目标16srDNA片段，然后对扩增的16srDNA进行DGGE，对凝胶染色并进行条带统计分析和切胶测序，使用序列数据进行同源性分析并建立了系统发育树．结果表明，该驯化后的sBBR生物膜和渗滤液原水中都有比较丰富的细菌多样性，驯化的生物膜细菌主要来自渗滤液原水，而且生物膜细菌在反应器正常运行时不会出现明显的群落结构变化；在该SBBR中有多种硝化细菌与反硝化细菌、好氧反硝化细菌和厌氧氨氧化细菌共存，说明该反应器中可能同时存在全程硝化反硝化、同步硝化反硝化和厌氧氨氧化3种脱氮方式．研究结果为sBBR脱氮微生物机理研究提供了一些有价值的参考依据．关键词：16srDNA；sBBR；PCR；DGGE；垃圾渗滤液；系统发育分析中图分类号：x172文献标识码：A文章编号：0250．330l(200r7)05一1095．cr7BacterialDiVersityinSequeIlcingBatchBio伺IlIlReactor(SBBR)forLandfillLeachateTreatmentUsingPCR．DGGEXn0Yon91，YANGZhao．huil，ZENGGuallg．Illin91，MAYan—he2，UUYou．shen91，WANGRong-juanl，XUZheng．1yong(1．CoUegeofEnvimnmentalScience8ndEn西neering，HunanUniversity，Changsha410082，China；2．InstituteofMicrobiology，ChineseAcademyofSciences，Beijing100080，China)Abstract：Forstudyingthebacterialdiversityand山emechaIlismofdenitrificationinsequencingbatIlbiofilmreactor(SBBR)treatinglandfiⅡleachatetoprovidemicrobialevidencefortechIliqueimprovements，totalmicrobialDNAwasextractedf而msampleswhichwerecollectedf而mnatIlr缸landfiuleach8teandbiofilmofasBBRtllatcouldemcientlyremoveNH?·Nandc0Dofhighconcentmtion．16srDNAf咖entswereamplifiedf而mthetotalDNAsuccessfullyusingapairofuniversalbacterial16SrI)NAprimer，GC341Fand907R，andthenwereusedfordenaturinggradientgelelectmphoresis(DGGE)analysis．ThebandsinthegelweI℃analyzedbystatisticalmethodsandexcidedf而mthegelforsequencing，andthesequenceswereusedforhomologyanalysisandthentwophylogenetictreeswereconstnlctedusingDNAStarsdhare．Resuhsindicatedthatthebacterialdivers畸0ftheb淌lminsBBRand血elaIl益Uleachatewasabundant，andnoobviouschangeofcommunitystmctureh印penedduringmnninginthebiofilm，inwhichmostbacteriacamef而mthelandfmleachate．Theremaybethreedifferentmodesofdeni研ficationin山ereactorbec8useseveraldifrerentnit谢如ngbact