蛋白质饲料木聚糖含量及其体外酶解效果研究

动物营养学报2007，19(6)：719—724ChineseJournalofAnimalNutrition蛋白质饲料木聚糖含量及其体外酶解效果研究张慎忠张克英丁雪梅谭权(四川农业大学动物营养研究所，雅安625014)摘要：本文通过体外酶解试验，考察木聚糖酶对豆粕、菜籽粕和棉籽粕的总木聚糖和水溶性木聚糖的降解效果，试图建立木聚糖酶与不同蛋白质饲料种类的定量关系。试验结果表明：①不同蛋白质饲料的总木聚糖和水溶性木聚糖的含量不同，豆粕、菜籽粕和棉籽粕的总木聚糖含量分别为5．62％、6．56％和8．20％；水溶性木聚糖含量分别为0．35％、0．97％和0．84％；②不同来源的3种蛋白质饲料的总木聚糖和水溶性木聚糖含量变异较小。在适宜的水环境中，菜籽粕的水溶性木聚糖含量显著增加，豆粕和棉籽粕的水溶性木聚糖变化不大；③木聚糖酶对3种蛋白质饲料的总木聚糖均有显著降解作用，对水溶性木聚糖有一定的降解作用，其中对菜籽粕的总木聚糖和水溶性木聚糖的降解作用均较大；以总木聚糖酶为标识，结合考虑成本，豆粕、菜籽粕、棉籽粕的适宜添加木聚糖酶水平分别为1000、1000和1500U／kg。关键词：木聚糖酶；木聚糖；豆粕；菜籽粕；棉籽粕阿拉伯木聚糖(Arabinoxylans)也叫戊聚糖(pentosan)或木聚糖(xylan)，主要由戊糖一木聚糖和阿拉伯糖组成，是广泛存在于植物性饲料的抗营养因子，可导致饲料养分利用率下降。木聚糖酶作为非淀粉多糖的主要降解酶之一，对降解木聚糖，提高饲料营养价值具有重要价值。目前，大部分研究集中于木聚糖酶对麦类饲料的影响_1。]，而对蛋白质饲料影响的研究较少。因此，本试验通过体外酶解试验考察木聚糖酶对不同蛋白质饲料中木聚糖的降解效果，大致确定适宜酶水平，为配合饲料中合理添加木聚糖酶提供科学依据。l材料与方法1．1饲料样品豆粕采集6种样品，菜籽粕采集3种样品，棉籽粕采集2种样品。其中4种豆粕(来自讷河、山东、黑龙江、巴西)、2种菜籽粕(来自成都、绵阳)和1种棉籽粕(来自新疆)采自成都市饲料原料批发市场，其中1种豆粕(来自雅安)采自雅安圣通饲料，1种棉籽粕(来自成都)采自华西希望集团。其余采自川农实验农场。试验准确记录样品产地。饲料样品于4c保存备用，其中采自川农的豆粕和菜籽粕、采自华西希望集团(成都)的棉籽粕样品供体外酶解分析用。1．2木聚糖酶木聚糖酶制剂(木聚糖酶活为10000U／g)由武汉新华扬生物技术公司提供。酶活定义：1个木聚糖酶单位是指在标准条件下(pH5．0，40℃)，1min从木聚糖中释放出1pmol木糖所需酶的量。1．3体外酶解实验每种饲料分别进行体外酶解实验，每种原料设6个木聚糖酶水平，每个水平4个重复。在一定水分(料水比为1：10)、温度(40℃)和pH(5．0)条件下作用2h，测定原料和水解物中水溶性木聚糖和总木聚糖的含量，确定水解1kg底物所需要的适宜木聚糖酶水平。1．4测定指标饲料原料水解前后的干物质含量：采用100～105℃烘箱干燥法。饲料原料水解前后的总木聚糖和水溶性木聚糖的含量：测定方法为地衣酚一盐酸法。木聚糖的测定(地衣酚一盐酸法)步骤如下：(1)标准曲线的绘制。取6组试管，配制0、40、80、120、160和200,g／mL标准木糖溶液，分别取1mL标准液加2．0mL蒸馏水，再加入3．0mL0．1％的FeC1。(溶于浓HC1)和收稿日期：2007-04-24作者简介：张慎忠(1981．)，男，山东枣庄人，硕士，主要从事家禽研究。E-mail：shenzhongzh@163．corn*通讯作者：张克英，教授，博士生导师。E-mail：zkeying@yahoo．corn维普资讯http://www.cqvip.com720动物营养学报19卷0．3mL的1％地衣酚(溶于无水乙醇)，100℃下作用30min，用1．0cm的比色杯，于580nm和670nm波长下测定吸光度，用双波长吸光度差值法作标准曲线。(2)总戊聚糖的测定。取样品10mg，加2mL2mol／LHC1100℃水解2．5h，2000r／min离心15min，取1mL于具塞试管中，依次添加2．0mL蒸馏水，3．0mL0．1％的FeC13溶液(溶于浓HC1)，0．3mL1％的地衣酚溶液(溶于无水乙醇)，沸水浴中反应30min，以3．0mL蒸馏水代替样品做空白，测定吸光度，根据标准曲线可得样品中戊聚糖的含量。(3)可溶性戊聚糖的测定。取样100mg，加10mL水，30℃振荡2h，2000r／min离心15min，取1mL上清液，加1mL4mol／L的HC1，在密封的试管内100℃保持2h，冷却，取1mL于具塞试管中，依次添加2．0mL蒸馏水，3．0mL0．1％的FeC13溶液(溶于浓HC1)，0．3mL1％的地衣酚溶液(溶于无水乙醇)，沸