刺孢小克银汉霉发酵产-亚麻酸时补料工艺研究

曰圈胜孟宜兰生一七衣,配山以及公泊奴对矛飞阅’孤抚侣白百产丫一亚麻酸时补料工艺研究古勇,王宏勋,颜克亮,梁淞,张晓显华中科技大学生命科学与技术学院,湖北武汉摘要研究刺饱小克银汉霉刀动发酵生产,一亚麻酸的补料工艺。结果表明,该菌株在含有住黄豆饼粉的发酵培养基中,以分批补料方式,即培养犯后补入岁食用糖与麦芽糖混合液,培养第时补入江户、,在培养第补入兀岁、,在培养第补入,几、。培养,菌体生物量达郭,油脂产量达。留,达了,含量达留飞,与补料前相比,生物量、油脂量、八、叭含量分别提高石、乃、名和。关键词刺袍小克银汉霉,发酵,丫一亚麻酸,补料工艺一一一刀之以,一旧,,,石一,一启,一,。多。,刀,一,,另伦,乙刀召朋,左偷厂,一中图分类号文献标识码文章编号一一一丫一亚麻酸,一,是一系列多不饱和脂肪酸的一种,在机体的物质代谢和生理调控上发挥着重要作用对治疗心血管疾病、糖尿病和艾滋病等有一定的疗效。丫一亚麻酸来源主要有两种一是特定植物来源,二是通过低等丝状真菌微生物发酵而得。二者相比,用微生物生产油脂有许多优点,已成为研究的重点。微生物发酵中,通过向培养系统中补充物料,可有效消除营养限制和不同离子之间的相互影响,收稿日期一一通讯联系人作者简介古勇一,男,硕士生,从事多不饱和脂肪酸的研究开发。对油脂发酵具有重要影响。本文针对筛选获得的高产,一亚麻酸的刺抱小克银汉霉门召丙傲。。。疏动菌株,研究补料工艺对微生物油脂产生的影响,为高含量,一亚麻酸油脂生产提供基础,材料与方法实验材料刺抱小克银汉霉。。,刁。。。。。。以以,编号由本实验室筛选与保存斜面培养基为培养基种子培养基土豆煮汁、食用糖、黄豆饼粉、的群以礴多、、自然。培养方法斜面菌种活化后接种到种子培养基,℃、培养,以接种量转种到摇瓶中培养基,培养后,再以接种量转接到摇瓶中,转速,℃下培养。,分析方法生物量侧定滤布过滤,洗涤多次,℃高温短时烘干至恒重。发酵液中的残糖测定下离心,上清液用苯酚一硫酸法测糖〕油脂提取干燥的菌丝体进行机械研磨粉碎破壁后,以乙醚为抽提溶剂浸提。油脂甲酷化用移液枪移取滴油样于具塞试管中,加人苯石油醚川,振荡,溶解后加人溶液,剧烈振荡,放置后加蒸馏水至刻度,静置分层,取上层清液分析。,气相色谱仪工作条件岛津一气相色谱仪附一数据处理,色谱柱尺寸为甲,固定液为谕的一丁二酸二乙二醇,载体为,流量为而,早饭巫巫巫画〕©1994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net下勺君,入,君口口采用氢焰离子化检测器,柱温为℃,检测器及进样口温度为℃。甲酷标准品由试剂公司提供。,含量分析取林样品进样,对照标准品保留时间进行定性,由面积归一化法确定油脂中的含量占所有脂肪酸的百分比。结果与分析碳源添加由图可见,补料前,培养菌体最大生物量达,最大油脂产量。在培养后期,生物量呈下降趋势,但变化不大,而油脂产量下降很快,在第最高可达,而油脂产量却只有月。一奋一刁陇生物量岁油脂含量卜奋油脂产量岁工麦芽糖浓度八图麦芽糖浓度的影响」卜补食用糖,卜补食用糖与麦芽糖刃︵飞︶啊鼻州刀‘川卜生物量闷油脂产量自工、时旬生物量的比较月,一‘斗飞决︸山古,,,声,乙︵闷谧︶崛代魏澳图时间补料前最佳结果一一一补食用糖,‘补食用糖麦芽糖时’油脂产量的比较补食用糖补食用糖麦芽糖亡一图门泊︵闷日谧日︶咧黛似巧石石︵掌︶洲目山一一二二二生立创贬怒习时间图发酵液中残糖量测定曲线测定发酵过程中残糖量可见图,在培养前中,菌体对糖的代谢最快,因此选择在菌体快速生长末期培养一次性补人的糖。通过对不同种类的糖进行实验,结果发现添加麦芽糖对菌体油脂中的提高有促进作用图。从图一图可以看到,添加食用糖麦芽糖后,菌体最大生物量为摊、最大油脂产量为,比添加食用糖相应数据稍低,但达到,比添加了食用糖的高出。与未补料的结果比,同样培养时间,虽然偏低,但油脂产量高很多,促进了油脂的生产,故选择在菌体生长末期培养一次性补入食用糖与麦芽糖。时间图的比较氮源添加在添加碳源的基础上,在配制培养基时分别一次性添加不同浓度、、、黄豆饼粉培养时间从添加碳源后开始算起。由实验结果来看图一图,氮源含量增加,生物量的提高很显著,油脂产量也相应有所增加,但却下降迅速,因此最终确定添加黄豆饼粉。丽丽硒戴而尹牙夕©1994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net娜举娜州工艺技术七触矛砚田砚丑兄加犯倾拟矛权对乃砚众侣扮刀生物量奋一油卜洲一油量酬子巧住奋尸闷卜仓锐一住刀︵谕︶咧鼻州时司图生物量的比较时旬图含的培养基中今一生物量盯一