海水小球藻培养条件的研究

书第!卷第#期烟台大学学报（自然科学与工程版）$%&’!(%’#)**+年,月-%./01&%231041560578/954:（(14./1&;<580<810=>0?5088/50?>=545%0）@-.&’)**+@@@文章编号：!**AB)*（)**+）*#B*)*CB*C小球藻培养条件的研究!于@贞，王长海（烟台大学生物工程系，山东烟台)CA**+）摘要：对影响小球藻生长的(1DEF#、(1(F#、GD)HFA、维生素等A种主要营养因素进行了优化，获得了以海水为基础的优化培养基配方：(1DEF#*’!*?IJ，(1(F#*’))+?IJ，GD)HFA*’**+?IJ，KDC’*’另外，适量添加土壤浸出液和维生素也会明显提高藻的产量’流加培养可以促进小球藻生物量的增加’关键词：小球藻；流加培养；维生素；土壤浸出液中图分类号：LMAM’)@@@@文献标识码：N小球藻（!#$%&##’())）为绿藻门（EO&%/%KD:41）小球藻属（!#$%&##’）单细胞藻，含有小球藻多糖、脂肪酸等多种营养成分，具有多种保健和药理作用，如小球藻多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗血栓及增强机体的免疫功能等药理作用［!］’经过热处理和破壁处理的小球藻，可直接制成小球藻片、小球藻颗粒剂或小球藻胶囊，适用于预防和辅助治疗高血压、高血脂、动脉粥样硬化、冠心病、消化性溃疡、免疫功能低下等疾病，还可用于减轻肿瘤放疗和化疗的副反应［)］’小球藻粉还可用于开发具有更高附加值的精细化工产品和医药制品，如工业上用于制取叶绿素、脯氨酸、油脂等；在医药领域用于提取有效活性成分制成各种医药制剂’另外，在环保方面小球藻可应用于污水处理’小球藻是光能自养型生物，它可和人形成一个循环系统，即人呼出的EF)可供小球藻生长，而小球藻产生的F)可供人体呼吸之用，这使得小球藻在航天方面具有重要的开发价值’要更好地利用小球藻，首先要获得大量的小球藻藻体，本研究通过优化小球藻培养条件来提高小球藻生物量，为其进一步的扩大培养提供依据’!@材料与方法!’!@藻种与仪器!’!’!@藻种来源@小球藻（!#$%&##’())）藻种由烟台大学海洋生化研究所提供’!’!’)@仪器@DPLBLQ振荡箱（哈尔滨东联电子技术开发有限公司）；JRPSBA*TU型立式自动电热压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）’!’)@实验方法!收稿日期：)**AB!!B*!@@@@作者简介：于贞（!M,#V），女，山东烟台人，讲师，硕士，主要从事海洋微藻方面的研究’!第期!!!!!!!于!贞，等：小球藻培养条件的研究#$%$!生物量的测定!用血球计数板计数$#$%$&!实验用培养基!在’(%培养基基础上进行优化$#$%$)!土壤浸出液的制备!首先取没有施化肥或农药的土壤在三角瓶（#*）底部铺上#+,厚的土层，随后加入#*蒸馏水，高压灭菌-,./后，静置%&0，倾出上清液即可使用［］$#$%$1!培养条件!%2，光强为&$)3#-45，转速为#&-6(,./下培养#$%$7!正交试验优化小球藻培养盐!小球藻生长所需要的营养元素有#)8%-种，天然水体的大多数元素都能满足它的需要，不会成为限制性因子$9、:、;是小球藻生长的主要营养元素$表#!因素水平表<=>$#!*?@?4AB’’=+CB6A!#$DE:=9F(G·*H#:=:F(G·*H#IE%;F&(G·*H##)-$-)-$-7)-$--)%1-$#--$#)--$-#)7-$#)-$%%)-$-%)!!小球藻营光自养生长，可直接利用空气中的9F%$9F%主要以E9FH的形式被利用$因此E9FH盐可直接作为小球藻生长的碳源&#$氮是生物最重要的营养成分，而硝酸盐一直是培养小球藻的一种普通氮源$培养基的DE是影响藻类有关生长代谢等许多生理过程的另一重要因子$本实验利用正交试验优化培养基中:=E9F、:=:F和IE%;F&的浓度及小球藻生长适宜的DE，采用*J（&）正交表进行四因素三水平正交实验。如表#所示$%!结果与讨论%$#!营养盐浓度和DE值对小球藻生长的影响按表#设计的因素水平在光照培养箱中培养，结果如表%所示$表%!正交试验及结果<=>$%!F6C0BGB/=4?5D?6.,?/CA=/K6?AL4CADE:=9F(G·*H#:=:F(G·*H#IE%;F&(G·*H#生物量(#-1·,*H######%M$-M%#%%%&-$-7#1$-&%#%J7$))%%##%%$)1%#%7$#%7#%#-M$M%%#7%$--J%#JM$--%##-&$#M%$J##7$%%&M$)M%%%J$#%%&$)1%)$)1%%#$)%%%7M$%-7$#)%11$M1%-)$)&1%$JJJ$#&#$%%#&$)·7-%·烟台大学学报（自然科学与工程版）第!卷#表$#因素水