测试瓶法测定循环水中的铁细菌_何世梅

分析与监测测试瓶法测定循环水中的铁细菌何世梅1,曹立群2,田剑临1,余伟民1,易绍金3(1.长岭炼化有限责任公司设备研究所,湖南岳阳414012;2.湖南石油化工职业技术学院炼油化工系,湖南岳阳414012;3.江汉石油学院化工系,湖北荆州434102)摘要:提出了一种适合循环水中铁细菌的简便测定法———测试瓶法。该法操作简便、测定快速,所测结果与原法不存在判据差异,适用于循环水水质检测及杀菌剂评价。关键词:铁细菌;检测方法;微生物中图分类号:TU991.21文献标识码:C文章编号:1000-4602(2003)11-0098-02铁细菌能使水中亚铁化合物氧化成红棕色粘性物(Fe2O3·xH2O),从而在铁管中形成软泥,它也是危害水系统最重要的微生物之一。在工业用水中,如果铁细菌大量滋生,将产生大量覆盖在金属表面上的氢氧化铁鞘层,这不仅降低了热传导效率,而且会造成金属管道的管径缩小或堵塞,降低水流量,使水质变差,同时造成电腐蚀并为硫酸盐还原菌提供极为有利的生长条件,因此铁细菌是循环冷却水中的一种必检菌。循环冷却水铁细菌的检测方法通常是采用中石化总公司生产部、发展部编制的《冷却水分析和试验方法》中的208与GB/T14643.6—93。两法大同小异,均是采用试管稀释法,操作繁琐、费时。为此,提出了一种适合循环水铁细菌快速检测的测试瓶法。1测试步骤①细菌测定推荐采用三瓶重复法,即一个稀释度作三瓶重复。将测试瓶排成一组,并依次编上序号。用1支无菌注射器分别取采来的水样1.0mL注入3个1号瓶内,充分震荡。②用另一支无菌注射器分别从1号瓶内取1.0mL水样注入到2号瓶内,充分震荡;再更换一支无菌注射器从2号瓶内取1.0mL水样注入到3号瓶内,充分震荡;依此类推,一直稀释到最后一瓶为止(每稀释一次就要更换一支注射器)。一般根据细菌含量决定稀释倍数,一直稀释到最后一级稀释度无菌生长为止(一般为3～4级)。③将测试瓶放入恒温箱中恒温[(30±0.5)℃]培养10d。④10d后将测试瓶取出进行观察记录:以铁细菌测试瓶中液体出现分层沉淀为铁细菌生长的依据,每一稀释度有几个出现分层沉淀即计为几。其统计指数按GB/T14643.6—93中的8.5、8.6条进行,统计查表按附录C表C1进行。2结果与讨论2.1铁细菌最佳生长期为了考察测试瓶法检测铁细菌的最佳生长期,进行了多次水样分析(见表1),结果表明,铁细菌的生长稳定期为7～10d,但也有极少数在培养10d后稳定一段时间,到第12、13天又继续生长的现象,但结果相差不大,故可认为铁细菌的最佳生长期为7～10d。2.2精密度精密度试验结果见表2。表2表明:①测试瓶法与原方法所测结果没有判据差异;②测试瓶法的精密度比原方法要好;③测试瓶法培养快速(7d就达稳定菌数),其培养时间仅为原方法的1/2。·98·中国给水排水2003Vol.19CHINAWATER&WASTEWATERNo.11表1铁细菌最佳生长期分析结果测定时间(d)4567891011121314稳定期(d)三循出水(个/mL)0.70.70.72.02.02.02.02.02.02.02.07三循出水(个/mL)2.52.52.54.54.54.54.54.54.54.54.57三循回水(个/mL)0.40.90.94.59.51.5×101.5×101.5×101.5×101.5×101.5×109三循回水(个/mL)0.00.72.5×109.5×102.5×1022.5×1022.5×1022.5×1022.5×1022.5×1022.5×10280.42.54.59.51.5×109.5×109.5×109.5×109.5×109.5×109.5×1090.39.51.6×103.5×101.2×1021.2×1021.2×1021.2×1021.2×1022.5×1022.5×10280.04.59.59.52.0×102.0×102.5×1022.5×1024.5×1024.5×1024.5×10210表2精密度试验结果样品名称方法8次平均结果X(个/mL)标准偏差变异系数(S/X)精密度(1-S/X)三循出水测试瓶法(7d)0.10.181.8-0.8原方法(14d)0.040.112.8-1.8注:由于微生物分析方法精密度的评价手段目前还未见报道,暂只能采用化学分析方法精密度的评价作为参考;原方法为《冷却水分析和试验方法》。此外,在试验过程中还发现测试瓶法具有如下优点:①操作十分简便(原法准备工作约要1d,现在不到1h;原来测定操作需要1h,现在只需几分钟);②检测操作无需在洁净工作台里进行。2.3油分、浊度的影响对有可能造成干扰的油分、浊度进行了多批次干扰试验,并与原方法进行了对照,结果见表3。表3铁细菌干扰试验结果方法