长江_嘉陵江_重庆段_源水有机提取物的类雌激素活性评价_朱毅

第一作者:朱毅,男,1967年出生,硕士,讲师,主要从事环境卫生和环境毒理方面研究。#通讯作者。*国家自然科学基金重点项目(No.59838300)、国家教育部98春晖计划(No.36)以及重庆市科技攻关项目(No.5772)资助。长江、嘉陵江(重庆段)源水有机提取物的类雌激素活性评价*朱毅田怀军舒为群#曹佳卓鉴波(重庆市第三军医大学预防医学系环境卫生学教研室,重庆市三峡库区生态环境与人群健康研究重点实验室,重庆400038)摘要为了解长江、嘉陵江(重庆段)源水有机提取物的类雌激素活性,分别于夏季和冬季采用GDX-120大孔树脂对位于城区上、中、下游5个断面长江、嘉陵江(重庆段)源水进行有机物的浓缩提取。用体外MCF-7细胞增殖试验检测有机提取物的类雌激素活性。结果显示,源水有机提取物均具有类雌激素活性。其类雌激素活性中、下游均高于上游,丰水期高于枯水期。关键词长江嘉陵江环境雌激素MCF-7细胞增殖试验EvaluationoftheestrogenicactivityoforganicextractsfromsourcewaterofYangtzeRiverandJialingRiverinChongqingsectionZhuYi,TianHuaijun,ShuWeiqun,etal.DepartmentofEnvironmentalHygieneoftheThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038Abstract:TheestrogenicactivityoforganicextractsfromsourcewaterofYangtzeRiverandJialingRiverinChongqingsectionhadbeendeterminedbycellproliferationtestofMCF-7cellsinvitro.TheorganicextractsweresampledwithamberliteGDX-120separatelyatfivesitesthatlocatedatupper,inneranddownChongqingsectionoftworiversandseasonallyatwinterandsummerseason.Theresultmanifestedthattheestrogenicactivityoftheor-ganicextractsfromsourcewaterofYangtzeRiverandJialingRiverinChongqingsectionwerefoundinallsamples.Theestrogenicactivityatinneranddownsectionwerehigherthanuppersection,anditwashigheratsummerthaninwinter.Keywords:YangtzeRiverJialingRiverEnvironmentalestrogen(EE)CellproliferationtestofMCF-7cells近年来,有机物污染对人群健康和生态系统的危害已成为一个新的全球性环境问题。对长江、嘉陵江(重庆段)源水的有机提取物进行GC/MS分析发现,该段源水存在严重有机物污染(共检测出101种有机污染物)。其中部分种类为已知的类雌激素化合物。但环境有机污染物在混合状态下的综合雌激素效应的研究还未见报道。环境雌激素对人类及动物的健康影响已引起人们的重视,成为目前内分泌干扰物的重要研究方向之一[1]。MCF-7细胞增殖试验是国外最常用的检测环境雌激素的方法之一,具有灵敏度高、可同时检测多种环境雌激素、快速简便的特点。本文利用对雌激素敏感的MCF-7细胞评价了长江、嘉陵江(重庆段)源水有机提取物的类雌激素活性。1材料与方法1.1材料MCF-7细胞株四川大学(原华西医科大学)公共卫生学院环卫教研室提供。主要试剂17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)、含酚红DMEM培养粉、不含酚红DMEM培养粉、葡聚糖4万(Dextran)、新生小牛血清(NBS)、二甲基亚砜(DimethylSulphoxide,DMSO)等。主要器材GDX-120大孔树脂、24孔细胞培养板、CO2孵箱、SW-CJ-2F(A)双人单面净化工作台、XDS-1实验室倒置显微镜、血球计数板等。1.2方法1.2.1水样采集和处理于2000年8月(丰水期,夏季)和2001年1月(枯水期,冬季)分别采集了本市以长江、嘉陵江、两江汇合后的长江为源水的5个水处理厂。采样点分布见图1。用GDX-120大孔树脂提取水中有机污染物[2],DMSO定容待检。1.2.2去激素小牛血清(CD-NBS)制备[3]NBS中