您好,欢迎访问污托邦&污水处理资料共享平台!

上传文档

当前位置:首页 > 文档 > 淡水样提取DNA方法

淡水样提取DNA方法

  • 海之魂
  • 0 次阅读
  • 0 次下载
  • 2020-03-31 14:15:41

还剩... 页未读,继续阅读

免费阅读已结束,点击付费阅读剩下 ...

下载券 0 个,已有0人购买

免费阅读

阅读已结束,您可以下载文档离线阅读

下载券 1 个,已有0人下载

付费下载
文档简介:

水样:水样:1.取样品1L,于50ml离心管,4℃13000g离心10min,弃上清,重复收集以富集菌体。2.加裂解液5ml,斡旋振荡器震荡3min以混匀;3.液氮–65℃水浴循环冻融3次,每次2min;4.加入纤维素酶、蜗牛酶、溶菌酶(终浓度分别为6mg/ml、3mg/ml、1mg/ml),37℃水浴90min,每15min轻轻颠倒混匀一次;5.加入0.5ml20%SDS和50ul30mg/mL蛋白酶K,55℃水浴30min,每隔10min轻轻颠倒混匀;6.4℃6000g离心10min,收集上清,转移到无菌2ml离心管;7.加入等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),轻柔混匀,4℃14000g离心10min,转移上层水相到2ml无菌离心管中;8.加入等体积氯仿:异戊醇(24:1),轻柔混匀,4℃12000g离心15min,转移上层水相到1.5ml无菌离心管中;9.加入0.6倍体积的异丙醇(或1倍体积的20%PEG6000–2.5MNaCl)室温沉淀90min,4℃16000g离心15min,弃上清;10.沉淀用冰预冷的70%乙醇洗涤一次,离心、风干,重悬于适量ul无菌水中。11.电泳检测DNA,并测定其浓度。

海之魂
海之魂
  • 29345

    文档
  • 13863

    金币
Ta的主页 发私信

29345篇文档

相关搜索

淡水 提取 DNA 方法

评论

发表评论
< /1 > 付费下载 下载券 1 个

Powered by DS文库

Copyright © 污托邦&污水处理资料共享平台! All Rights Reserved. 鲁ICP备19035071号-2
×
保存成功