蚕肠道好氧微生物菌群的研究

第23卷第2期2001年4月西南农业大学学报J叫n1且Iofsau山we8tAgcIIlturalUnlvevaVol，23，No．2Avr．200l文章编号：1000—2642(2(~01)02—0117—03蚕肠道好氧微生物菌群的研究易发平，王林玲，周成，陈家莲，张健飞，周泽扬(农业部蚕桑学重点实验室，西南农业大学蚕桑丝绸学院，重庆400716)摘要：以夏芳蚕品种为材料，对算不同蚕期、不同龄期间脯道好氧微生物种群构成度其变化情况进行了系统的研究。蛄景表明：春叠肺道好氧茸教量较多，以厮杆茸、微球茸科茸和芽胞杆茸科茸为主；秋蚕厮道好氧茸只有少量截球茸耕茸和芽胞杆茸耕茸存在；人工饲料育肺道好氧茸教量较少，以芽胞杆茸为主。关键词：家蚕；肺道；好氧截生物中田分类号：s883．81文献标识码：AS兀mlⅢSONOBUGA1[EAEROBESIN皿IN髓s】田ESOFORMⅥ—p．WANG一】jJlg．2~IOU．咖抽一lhn．ZHANG脑一旧．2~IOUze—yang(The脚&cI1】tuI出啪工y^1huMinlmy．Go1ldSericultu~蛐d黜kgi嗍，血嘲Aa1l扫删Univerai~一凸棚口g~Of716．c)Abs嘣：A8y$t~Csh由waamadedthe伽d0nandmlclu0f。b北iⅡthe．删XiaFangraceh积min越南工哪lBr0dBand啪diB．s咖sflk~rmawere宕l】W工l呻havelr．皿吐g直Ee北rob∞intheiri呲e寡妇-bei∞mp0sedmmnly0fd坼j·liesEntero]~a．b∞删Badll．'Paeintes6ne~ofal】h1mIIsilb咖∞nedonlyafew∞r0be8蛐0c啪andBadl~．Thenumberaerobesinthe妯曲thesilb删rearedwithart~cialfodder哪mall-伽miIlgtmdnlyBacillusbaa．Keyords：sJJJctmml；Tm诧$dJ；0baerobe动物肠道是多种微生物生长繁殖的理想场所。正常肠道微生物对宿主具有营养、免疫、生长刺激、生物拮抗i1J等作用，是机体的生理组成部分【2_2。迄今，有关人和一些家禽肠道微生物的研究报道较多，对其肠道正常菌群的构成有了较为探刘的认识，并研制了许多微生态翩剂来建立良好的微生态环境。蚕是有着巨大经济效益和社会效益的重要经济昆虫。但是蚕业生产过程中一直存在着叶丝转化率低(10％左右)，桑叶成本占蚕茧生产成本的50％以上。同时，蚕病发生率高，我国每年因蚕病损失的茧量达10％以上【3j。因此．通过多种渠道提高蚕对桑叶的利用率．提高叶丝转化率，减少蚕病的发生．是蚕业生产上长期面临的重要课题。除了着眼品种的遗传本质改良，调节和改善蚕肠道微生态环境亦是不可忽视的另一方面。20世纪60，70年代，日本学者饭冢敏彦、潼泽义郎、河北俊彦【4．5,6J研究了细菌性蚕病的病原苗、致病机理和治疗途径。在国内，80年代马文石L7J对柞蚕吐白水病中肠内的细菌种类及其致病性进行了研究。1995年孙雪奇等L8J研究了家蚕肠道好氧和部分兼性厌氧微生物，试图模拟家蚕肠道微生态环境制成蚕生态制剂来增强肠道对营养物质的吸收和增强蚕对疾病的抵抗力。李蒙英等J对现行二化性蚕品种5龄蚕肠道镦生物进行了研究。为了更深刻地认识蚕肠道微生态环境，为有目的的人为调控和改良蚕肠道微生态环境打下基础．对蚕萎昌羿驾翌)．男，重庆万州人，西南农业大学硬士研究生．从事应用生物工程研究。*为通讯作者。维普资讯http://www.cqvip.comll8西南农业大学学报2o01年4月品种夏芳不同蚕期、不同龄期间肠道微生物种群构成及其变化情况作了系统的研究。1材料和方法1．1材料该研究所用蚕品种夏芳由实验室蚕房提供。对照菌株：大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌由西南农业大学资环学院微生物教研室提供。1．2方法1．2．1取材1，2龄蚕。将蚕先在70％酒精中消毒．灭菌水中清洗后，用消毒解剖针去头，挤出肠液0．1g，装于灭菌离心管。3—5龄蚕，将蚕进行体表消毒后，用消毒解剖刀取出中肠，取1g肠液，装于灭菌试管。1．2．2茵群的分高好氧菌及兼性厌氧菌的分离：将取得的蚕肠液搅拌均匀，稀释到1000倍，1o000倍，各取0．2Ⅱ1l到各种培养基上(普通培养基、伊红美兰培养基、高盐甘露醇琼脂、YxT琼脂、s．s琼脂)，涂布均匀，于37培养箱中培养3—5天，挑取单菌落，编号，并计数；将得到的菌进一步纯化(镜检为单一菌)，接种到斜面培养基上保存。1．2．3茵群鉴定将纯化后的单一菌进行以下生化试验：革兰氏染色、芽胞染色、过氧化氢酶的梗I定、氧化酶的测定、好氧性试验、葡萄糖发酵试验、甲基红试验、乙酰甲基甲醇试