晚期垃圾渗滤液MBR亚硝化系统中细菌及功能菌的多样性

第43卷第9期2017年9月北京工业大学学报JOURNALOFBEIJINGUNIVERSITYOFTECHNOLOGYVol.43No.9Sept.2017晚期垃圾渗滤液MBR亚硝化系统中细菌及功能菌的多样性王秀杰，李军，李芸，魏佳，张彦灼，翟杰一，王思宇，张伟光(北京工业大学建筑工程学院，北京100124)摘要：为了处理晚期垃圾渗滤液，利用膜生物反应器（membranebioreactor，MBR)实现了稳定亚硝化.分别构建总细菌通用克隆文库和针对亚硝化功能菌氨氧化菌（ammoniaoxidizingbacteria，AOB)的功能基因---amoA基因的克隆文库，来研究稳定期亚硝化系统中微生物多样性.从16SrDNA克隆文库中随机挑选82个阳性克隆子进行序列测定，将测序结果与Genbank中已有模式菌株的序列进行比对后发现，亚硝化系统中主要有4个优势菌群，分别是Proteobacteria类群（64.65%)、未培养菌（unculturedbacterium)类群（18.3%)、Bacteroidetes类群（9.76%)、Firmicutes类群(7.32%c).构建针对AOB的amoA功能基因的克隆文库，从文库中挑选73个阳性克隆子进行序列测定，经序列比对后发现在系统中仅检测到了亚硝化单胞菌属（Nitrosomonas)和未培养菌，分别占41.1%和58.9%.这表明系统中起到亚硝化作用的微生物种群主要是亚硝化单胞菌属（Nitrosomonas).此外，未培养细菌的大量存在表明，系统中还存在着丰富的微生物资源等待进一步的开发利用.关键词：晚期垃圾渗滤液；膜生物反应器（MBR);亚硝化；克隆文库；微生物群落结构中图分类号：X703.5文献标志码：A文章编号：0254-0037(2017)09-1416-10doi：10.11936/bjutxb2016100036DiversityofBacteriaandFunctionalBacteriainMBRShortcutNitrificationSystemTreatingLateLandfillLeachateWANGXiujie，LIJun，LIYun，WEIJia，ZHANGYanzhuo,ZHAIJieyi，WANGSiyu，ZHANGWeiguang(CollegeofArchitectureandCivilEngineering，BeijingUniversityofTechnology，Beijing100124，China)Abstract：Inordertofindthebettermethodtodealwithlatelandfillleachate，thestablepartialnitrificationsystemwasoperatedintheMBR(membranebioreactor).Themicrobialcommunitystructureofthestablepartialnitrificationphasewasinvestigatedbythetotalbacterialclonelibraryandthecloninglibraryofammoniaoxidizingbacteria(AOB)functionalgeneamoA.82positivecloneswereselectedrandomlyfrom16SrDNAclonelibraryandtheirsequencewasdetermined.Theresultsshowthattherearefourdominantbacteriumgroupsinthestablepartialnitrificationphase：Proteobacteria(64.65%)，unculturedbacterium(18.3%)，Bacteroidetes(9.76%)，andFirmicutes(7.32%).BuildingonthecloninglibraryofAOB爷sfunctionalgeneamoA，73positivecloneswereselectedfromthelibraryandtheirsequencewasalsodetermined.Comparedwithbasiclocalalignmentsearchtool(BLAST)，theresultsshowthatonlytheNitrosomonasandUnculturedbacteriumaredetectedinthesystem，andtheirproportionis41.1%and58.9%，respectively.Thisphenomenonshowthatthenumber