MS31A的MVR-PCR分型

MS31A的MVR—PCR分型趸宁省刑事科学技术研究所(沈船110032)姜先华侯光伟一——————～———_—一摘要建立一种快速MVRoPCR分析方法．对中国汉族群体样本进行小卫星MS31A(座)分型及其频率调查。采用同位素掺入扩增和中性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离技术。对200名无关个体血掖样品的分析结果表明，每一样品MVR．PCR图谱均可获得近40条谱带。经计算机编码分析，不同个体的编码均不相同。MS31A前4O个重复单位1、2、3、4型的频率分别为25．3％，272％，473％和0．2％；DP值可达99．999999999999％；四代家系分析表明：亲代小卫星MS31A的重复单位可稳定地传递给子代，符合盂德尔遗传规律。灵敏度分析显示：该技术最低能检测出lng的基因组DNA。MVRPCR分析方法在法医学个人识别方面具有应用价值。Guangwei／L缸0ningProvince110032AbstractArapidMVR-PCRtypingatMS31AWt'J~developed．Fourdifferentkindsmicrovariantfrequencie~0fMS31AlouesataChineseHanpopulationwasinvestigated．Iso-topeincorperatingamplicarionandfollowedbytheeleetrophoresisofnaturepolyaerylamidegelwereapplied．Bloodsamplesfrom200unrelatedindividualsofHanpopulationwerearia-1vzed．Theresul~showedthatabout40bandsOnMVR—PCRmapsofeachsamplewereob-servedThroughcodinganalysiswithcomputer，itwasfunrndthatdifferentindividualhasdifferentcodingThefrequenciesofl，2，3and4type~ofthefirst40repeatunitsatMS31Awere25．3％+27．2％，47．3％and0．2％respectively．Thediscriminatingpower(DP1Wt'J~999999999999999％．Theresultsofafamilystndyof4generations，7mem—bersshowedthatrepeatunitsofMS31Afromparentscouldsteadilypassedtotheirdecen—dants．andeonIormedtOtheMe~delianinheritance1aw．ThismethodcoulddetectedlngRen0meDNA．Theresultsdemonstratedthatthisisasimple，rapidmethodwithhighsen—sitivityandhighdiscriminatingpower，andcanbeappliedtoindividualidentificationofforensicseience．KeywordsForensicscienceIndividua1identificationMS31AMVR-PCRMVR-PCR分析技术，采用分子生物学技术方法分析小卫星DNA重复单位内部碱基的变异，获得多态性信息，并将其用一组数十位数的密码表示。所得到的遗传密码因人而异，具有很高的灵敏性和极高的识别能力。这种技术克服了DNA指纹技术检材用量大(Lug级)及常用的单位点或2～3个基因座PCR检测技术识别能力低的不足，能够解决当前法医学中常见微量生物物证的个体识别问题，具有广阔的应用前景。目前多数研究均是采用探针杂交MVR．PCR方法，分析集中于MS32C、”。本研究选择MS31A进行分析】，期望建立一种操作简单、快速、实验周期短(2d)、费用低、结果准确、可靠的快速MVR．PCR分析方法。1材料与方法1．1材料197塑第一卷一4一笪生一，●志一杂一学一～监／塑维普资讯http://www.cqvip.com200份中国沈阳地区汉族无关个体新鲜血液(中国医科大学第一附属医院血库提供)；2十四代7口家系血液(取自辽宁省朝阳市北票县)。1．2方法1．2．1实验方法(1)扩增摸板的制各：见文献【5]；(2)MS3IAMVR—PCR分析引物的选择与台成：MS31A位于D7S21基因座上，其基本重复单位长度为20bp，有两个相邻的碱基替换多态性。5端为G／A与C／T，其中C／T变化更具有多态性。本研究根据C／T变化设计引物(图1)。$1tt3A