一株高效好氧反硝化细菌的分离鉴定及脱氮性能研究

·研究报告·生物技术通报BIOTECHNOLOGYBULLETIN2019,35(9):202-209收稿日期：2019-04-19基金项目：广东省海洋与渔业发展专项资金（2017A0003，2017A0007，A201701B10），广东省现代渔业发展专项资金（SDYY-2018-10），2018国家级大学生创新创业训练项目（201811078020）作者简介：李文甫，男，研究方向：好氧反硝化菌；E-mail：190738593@qq.com通讯作者：陈琼华，女，硕士，副教授，研究方向：微生物酶制剂；E-mail：qionghua2010@163.com高密度集约化的池塘养殖模式常会引起水质污染，特别是水体氨氮、硝态氮和亚硝态氮等严重超标，对水生动物有直接且严重的毒害作用，造成经济巨大损失［1-5］。针对现阶段养殖池塘的严重问题，生物脱氮是一种有效途径［6］。传统生物脱氮一般认为硝化作用是好氧的自养过程，反硝化作用是严格一株高效好氧反硝化细菌的分离鉴定及脱氮性能研究李文甫1杜柳冰1，2刘思莹1翁美遂1舒琥1陈琼华1（1.广州大学生命科学学院，广州510006；2.中山大学医学院，广州510000）摘要：从广州市西朗珠江水产研究所养殖池中分离新型好氧反硝化细菌，旨为开发新型生物脱氮工艺奠定基础。利用3种不同筛选培养基分离好氧反硝化细菌，测定在单一氮源培养基中发酵的生长曲线和脱氮性能，通过形态和16SrRNA基因序列分析对菌株进行鉴定并构建系统发育树。分离得到一株高性能好氧反硝化菌株BB-17，该菌株在单一氮源培养基中以28℃，180r/min振荡培养时，其对数期出现在6-24h，氨氮去除率在18h达93.92%，硝态氮去除率在48h达66.11%，亚硝态氮去除率在48h达99.10%。BB-17为革兰氏阴性短杆菌，16SrDNA序列分析结果与Pseudomonasvancouverensis（AJ011507）比对具有98.41%同源性，确定BB-17为假单胞菌属并命名为Pseudomonassp.BB17。关键词：分离；异养硝化；好氧反硝化；假单胞菌DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0339IsolationandIdentificationofanEfficientAerobicDenitrifyingBacteriumLIWen-fu1DULiu-bing1，2LIUSi-ying1WENGMei-sui1SHUHu1CHENQiong-hua1（1.SchoolofLifeScience，GuangzhouUniversity，Guangzhou510006；2.SchoolofMedicine，SunYat-senUniversity，Guangzhou510000）Abstract:NewtypesofaerobicdenitrifyingbacteriawereisolatedfromtheculturepondoftheXilangPearlRiverAquacultureInstituteinGuangzhou，aimingatlayingthefoundationforthedevelopmentofanewbiologicalnitrogenremovalprocess.Threedifferentscreeningmediawereusedtoisolatetheaerobicdenitrifyingbacteria，andthegrowthcurveanddenitrificationperformanceoffermentationinasolenitrogensourcemediumweredetermined.Thenmorphologyand16SrRNAgenesequenceanalysiswereemployedtoidentifythestrainsandaphylogenetictreewasconstructed.Asresult，ahigh-performanceaerobicdenitrifyingstrainBB-17wasisolated.Whenthestrainwasculturedat28℃，180r/mininasolenitrogensourcemedium，thelogarithmicphaseappearedat6-24handtheremovalrateofammonianitrogenwasupto93.92%at18h，thatofnitratenitrogenreached66.11%at48h，andthatofnitritenitrogenreached99.10%at48h.BB-17wasaG