_对水的细菌学检测中几个问题的讨论

油气田环境保护9917年第7卷第l期对水的细菌学检测中几个问题的讨论李香云周长征(胜利石油管理局技术检测中心环境监测总站)摘要“大肠菌群”是水质污染的指示菌,浏定大肠菌群的方法主要有多管发酵法、滤膜法。多管发酵法实验周期较长,适用于较复杂的水样检浏。本文对多管发酵法实验过程中的一些具体问题、如革兰氏染色法中的注意事项、初发酵24h内产酸不产气样品的处理,多管发酵法操作步骤是否可简化等、结合实践经脸进行了讨论和分析。主题词细菌水质污染检测DiscussionsaboutProblemsofwaterbaeteriadeteetionLiXiuyunZhouChangzheng(Enviornmental几五,nitoringeCntarlStation,ShengliPetorleumAdminstartion)ABSTRACTColonbaeteria15thepollutionindieatorofwaterquality.Themeansofdeterminingeolonbaeteriaaremainlymethodsofmultitubularfermentationandfile-teringfilm.Theexperimenteyeleofformermethod15relativelylonger,butsuita仪eformoreeomPlieatedwatersampledeteetion.WiththeirexPerienee,authorsdiseussedandanalyzedproblemsoeeurredduringexperimentproeessofmultitubular,suehasthepointsforattentionofgram一stainmethod,disposalofsamplewhiehdoesnotprodueegasininitial24hoursoffermentationandwhetherornottosimplifyitsoperatingsteps.SUBJECTHEAD一NGbaeteria,waterquality,pollution,deteetion水是自然环境和人类生存中不可缺少的。水质好坏一直是环境监测的主要工作之一,对水体中的细菌特别是病原菌的测定是评价水质好坏的一个重要指标。“大肠菌群”是水质粪便污染的指示菌。侧定大肠菌群的方法主要有多管发酵法和滤膜法两种lj[。多管发酵法实验周期长,可适用于较复杂的水体,滤膜法虽然较快,但仅适用于杂质较少的水体,常用于自来水厂的常规监测。当然,这两种方法也都在不断的发展中。我站采用多管发酵法。在完成例行监测的过程中,对不同种类的水样如自来水、水源水、工业废水、医院废水、生活污水等均做了大量实验,现就实验中值得注意的有关问题进行讨论。李秀云,1993年毕业于苏州城建环保学院环保系环境工程纷业,现在胜利石油管理局环境监测总站工作,助工。通讯地址:山东省东营市胜利石油管理局环监总站邮编:25700。第7卷第1期李秀云等:对水的细菌学检测中几个问题的讨论1试验所用玻璃器皿应是硼硅玻璃制品,试管的管壁应比普遍化学用试管厚,操作过程中才不易破损。2为收集大肠菌发酵乳糖产生的气体需倒置德汉氏盲管,盲管初放入培养液时管内会有少量空气不能排出,但经高温高压灭菌后盲管内的空气将排出,内部充满培养液。3接种工具主要是接种环,若无专门的接种环则可自制,一般可用铂丝或镍丝弯制而成,较粗的电炉丝也可,弯成的小环不要太大,否则不易拾取菌落。4革兰氏染色是区分细菌类别的一种重要方法,染色过程中应注意几个问题。①制作涂片时细菌菌落要涂抹均匀以利于染色和观察;②酒精脱色要特别注意把握脱色时间,一般以脱色的酒精刚刚无色时即用蒸馏水冲洗;③在显微镜下观察细菌颜色应以疏松分散区域的细菌颜色为准;④蒸馏水冲洗涂片时水流切忌过急过大。5根据国家标准,多管发醉法分为初次发酵、平板分离和复发酵三步。在实际工作中,为节省时间,有些同志提出做完初发醉后直接查表,也就是说,省略了后两步确定实验。为验证简化方法的可行性和准确性,针对不同类型的水样做了多组实验,从实验结果看,原则上较为复杂的水样如医院废水、生活污水等应该做完后两步实验,不可简化。虽然多数情况下初发酵产酸产气的试管经验证确定为大肠菌群阳性,但也有些医院废水、生产污水水样在进行平板分离验证时出现大肠菌阴性反应,因此在时间较紧时至少也要做完平板分离,因为大量的实验证明,做完前两步的测定结果与三步法测定结果的符合率可达92%。6对初发酵中24h内产酸不产气的试样应如何处理,可否认为是大肠菌群阴性,这也是实验中经常碰到的问题,而且往往出现在水样含细菌较少或浓度较低的情况,通过实验说明此种情况可疑,应该延迟培养24