微滤法分离人血中脱落上皮细胞

刑事技术2019年第44卷第1期·研究与探讨·DOI：10.16467/j.1008-3650.2019.01.016微滤法分离人血中脱落上皮细胞朱典，高珊，张颖，张广峰，聂昊，刘开会（公安部物证鉴定中心，北京100038）摘要：目的建立基于微滤技术分离检验人血中脱落上皮细胞的新方法。方法选用微孔滤膜并构建细胞分离过滤平台，优化过滤参数；制备15组混合细胞悬液，每组包含2个等比例混合的样本，1个进行常规DNA检验，另1个经过滤平台过滤，取滤膜作DNA检验，对比两者的STR分型结果，评判过滤平台的细胞分离效果。结果当流量为250mL/h、滤膜孔径30µm时，白细胞滤除率可达90%以上，而脱落上皮细胞截留率不低于70%；对15组混合细胞悬液经分离检验，14组获得预期结果。结论该方法可用于人血中脱落上皮细胞的分离检验，能够改善此类检材中目的细胞的STR分型结果，为刑事案件中血迹浸染的烟蒂等混合生物检材的细胞分离检验提供了一种新思路。关键词：微孔滤膜；细胞分离；DNA检验；混合生物检材中图分类号：DF795.2文献标识码：A文章编号：1008-3650(2019)01-0079-04MicrofiltrationtoIsolatetheExfoliatedEpithelialCellsinHumanBloodforSTRTestZHUDian,GAOShan,ZHANGYing,ZHANGGuangfeng,NIEHao,LIUKaihui(InstituteofForensicScience,MinistryofPublicSecurity,Beijing100038,China)ABSTRACT:ObjectiveToestablishanewmethodforexfoliatedepithelialcellstoisolatefromthecontaminatedhumanbloodbasedonmicrofiltrationtechnology.MethodsAfilteringplatformwasbuiltfromtheselectedmicrofiltrationmembraneforcellisolation,withoptimizationoftheitemsofporesizeandflowingrate.15groupsofequally-pair-mixedindividual-differentcellsuspensionswereprepared,witheachgroupcontainingtwoidenticalsuspensions,oneofwhichwasdirectlytreatedwiththeroutinestandardDNAextraction/testandtheotherfirstlywiththefilteringplatformandthenundergonetheDNAreleaseandharvestsothattheSTRtypingwascarriedoutandcomparedwiththecorrespondingstandardone.ResultsWhenflowingrateisat250mL/handmembrane-poreof30µm,theremovalofwhitebloodcellsreachesupto90%,withmorethan70%oftheexfoliatedepithelialcellsbeingretained.14outofthe15groupsofthesuspensionsmeetthedesiredrequirements.ConclusionsThemethodisapplicabletotheisolationofexfoliatedepithelialcellsinhumanblood,helpfultooptimizetheSTRtypingofthetargetcellsinmixedsamples,thusprovidinganewapproachindealingwithmixedbiologicalsamples,e.g.,theblood-stainedcigarettebutts.KEYWORDS:microfiltrationmembrane;cellisolation;DNAtest;mixedbiologicalsample刑事案件中，嫌疑人遗留在现场的血迹浸染的多为混合STR（短串联重复序列）分型，甚至因污烟蒂、手套等人血与脱落上皮细胞混合的生物检材屡染人血的优势扩增而导致仅获得受害人的单一STR见不鲜。由于受害人血的污染，常规DNA检验结果分型，这不仅增加了结果分析的难度，更可能丢失指基金项目：基