_大庆石化废水遗传毒性水平的测试研究

第19卷�第3期环境研究与监测2006年09月科研报告(20~21)大庆石化废水遗传毒性水平的测试研究于�凤,柳�淼,陈言顺(大庆市环境监测中心站,黑龙江大庆�163316)摘要:报道了利用蚕豆根尖细胞微核技术监测石油开采和石油化工废水遗传毒性以及废水的处理效果.经统计学分析,各排口废水均有不同程度的遗传毒性效应.并利用污染指数进行毒性等级的划分,为行业污染源管理、控制污染物总量提供科学依据.关键词:蚕豆根尖;微核千分率;石油化工;废水中图分类号:X742���文献标识码:A���文章编号:(G)06060(2006)03-0020-02��微核技术是利用环境污染因子引起生物细胞染色体畸变产生微核而建立的一种新技术.其原理是植物染色体在复制过程中,受到污染因子的影响,经常会断裂,当完成细胞分裂形成新的细胞核时,这些断裂下来的染色体断块就独立成为大小不等的小核即微核.所以,微核技术可测定细胞染色体受损伤的程度,可以直接反映污染物对生物体遗传物质的影响,这一点是理化方法所不及的.用蚕豆根尖细胞微核技术监测水质污染的测试系统,已被国家环保总局编入�生物监测技术规范�.1�材料和方法1.1�材料松滋青皮豆由华中师范大学生物系提供.1.2�方法1.2.1�水样的采集和处理在各排放口采集24h混合水样,测pH值,氢氧化钠和盐酸溶液调水样的pH至中性.由于蚕豆根尖细胞对诱变污染物较为敏感,当诱变污染物浓度过高会产生抑制现象,故对所有企业排放废水用蒸馏水稀释成50%做为测试液.1.2.2�操作步骤按�环境监测技术规范�的要求进行浸种、催芽、染毒、修复、固定之后,用1coml的盐酸在恒温水浴中60�水解3min,用自来水漂洗,蒸馏水充分浸收稿日期:2006-03-02.作者简介:李钟玮(1962-),高级工程师,从事水质毒理分析,大型仪器分析等环境监测科研工作.泡后,切1mm根尖于载波片上,用石碳酸品红改良液染色10min后压片,至根尖细胞染色区呈云雾状.每一处理水样观察3~5个根尖,每个根尖计数1000个细胞,计算微核千分率MCN�.微核识别标准见�环境监测技术规范�.1.2.3�毒性等级划分PI值在0~1.5级,为I无污染;PI值在1.5~2.0级,为II轻污染;PI值在2.0~2.5级,为III中污染;PI值大于3.5级,为IV重污染.2�结果与分析2.1�环磷酰胺对诱导蚕豆根尖细胞的剂量-效应关系本试验1mg/L环磷酰胺为阳性对照物,以蒸馏水为阴性对照物,用不同浓度的环磷酰胺诱导蚕豆根尖细胞微核结果见表1.将环磷酰胺的浓度与测试的MCN�的均值进行回归:r=0.963,回归方程y=5.17x+14.88,可见环磷酰胺对蚕豆根尖细胞的致突变性具有明显的剂量-效应关系.2.2�不同行业废水的污染物诱变效应对10家污染企业排放废水进行测试,结果见表2.由表2看出,不同行业废水和对照组的微核检出率显著不同(F>F0.01,P<0.01)说明不同行业各种废水存在不同程度的遗传毒性效应.按污染指数将各排口污水遗传毒性等级得到:重污染PI>3.50相当于1mg/L环磷酰胺所具有的诱导效应,污水类型为石油炼制、石油化工行业:中污染2.0F0.01,P<0.01,说明二者差异极其显著,毒性去除率40%左右,与理化分析结果相吻合.四家污水处理场处理前后的MCN与空白(CK)进行F检验,各样品处理间均有显著差异表1�环磷酰胺诱导蚕豆根尖细胞微核结果环磷酰胺含量/mg�L-1MCN/�x�Se显著度CK25.32(9.33�7.45�8.54)8.44�0.550.546.73(14.20�15.15�17.38)15.58�0.98P<0.011.074.16(26.50�22.88�25.13)24.72�0.97P<0.015.0146.45(40.98�48.14�51.33)48.82�1.30P<0.0110.0186.53(59.33�64.76�62.44)62.18�1.57P<0.01表2�不同行业废水蚕豆根尖细胞MCN�结果污染源排口污水类型MCN�总数x�SePI差异显著性石化总厂炼油厂石油炼制38.48�43.47�39.6940.40�1.365.13P<0.01林源炼油厂石油炼制32.65�34.57�36.8634.69�1.224.