EGCG对Ro52介导的THP-1细胞凋亡及炎症因子的影响

·38·第28卷第26期中国现代医学杂志Vol.28No.262018年9月ChinaJournalofModernMedicineSept.2018收稿日期：2018-02-03[通信作者]刘畅，E-mai：changliulnedu@163.com；Tel：13909896598DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2018.26.006文章编号：1005-8982（2018）26-0038-07EGCG对Ro52介导的THP-1细胞凋亡及炎症因子的影响张懿1，刘畅2（1.锦州医科大学，辽宁锦州121000；2.锦州医科大学附属第一医院内分泌科，辽宁锦州121000）摘要：目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对SSA/Ro52（Ro52）介导的人单核-巨噬细胞株THP-1凋亡及炎症因子分泌的影响。方法构建稳定Ro52过表达质粒（pCMV-Ro52），pCMV-Ro52转染THP-1细胞48h，检测Ro52mRNA和蛋白表达水平的变化，采用膜联蛋白-荧光素异硫氰酸酯和碘化丙锭双染检测THP-1细胞凋亡率，酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、IL-13水平。pCMV-Ro52质粒转染48h后,分别使用0、5、10、20和50mg/LEGCG处理细胞24h，检测Ro52表达的变化、THP-1细胞的凋亡，以及TNF-α、IL-1β、IL-13水平。结果pCMV-Ro52促进Ro52表达（P<0.05），上调THP-1细胞凋亡率及TNF-α、IL-1β、IL-13水平（P<0.05）；在Ro52过表达的THP-1细胞中，与0mg/LEGCG组相比，10、20和50mg/LEGCG组Ro52蛋白表达水平、凋亡率及TNF-α、IL-1β、IL-13水平降低（P<0.05）。结论Ro52过表达可促进人单核-巨噬细胞THP-1凋亡及炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-13分泌；EGCG可减弱Ro52介导的THP-1细胞凋亡，减少炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-13的分泌。关键词：单核-巨噬细胞；Ro52；细胞凋亡；炎症因子；表没食子儿茶素没食子酸酯中图分类号：R593.241文献标识码：AEffectofEGCGonRo52-inducedapoptosisofTHP-1cellsandinflammatoryfactorsYiZhang1,ChangLiu2(1.JinzhouMedicalUniversity,Jinzhou,Liaoning121000,China;2.DepartmentofEndocrinology,theFirstAffiliatedHospitalofJinzhouMedicalUniversity,Jinzhou,Liaoning121000,China)Abstract:ObjectiveToexploretheinfluenceofepigallocatechingallate(EGCG)onapoptosisofhumanmonocytemacrophagecellline(THP-1)andexpressionofinflammatorycytokinesthroughRo52over-expression.MethodsRo52over-expressionplasmid(PCMV-Ro52,20μg)wasconstructedandtransfectedintoTHP-1cellsfor48h.Real-timefluorescentquantitativePCRwasusedtodetectthemRNAlevelofRo52andtheproteinexpressionlevelofRo52wasdetectedbyWesternblot.TheapoptosisofTHP-1cellswasdetectedbyAnnexinV-FITCandpropidiumiodide(PI)staining.ThelevelsofTNF-α,IL-1βandIL-13weremeasuredbyELISA.After48hofpCMV-Ro52plasmidtransfection,thecellsweretreatedwithEGCGatdifferentconcentrations(0,5,10,20and50mg/L)for24h.TheproteinexpressionlevelofRo52,theexpressionlevelsofTNF-α,IL-1βandIL-13andtheapoptosisrateofTHP-1cellsweredetected.ResultspCMV-Ro52(20μg)signific