smad4和cyclinA蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及当归黄芪超滤膜提取物对其的增殖作用

2018年第31卷第1期中国科技核心期刊当归和黄芪是补血益气的常用中药，以黄芪和当归按照5颐1比例组方而成的当归补血汤作为经典方药临床用于补血养血，尤其针对卵巢功能衰退引起的月经量过少甚至闭经的患者，方中重用黄芪大补元气，以资气血生化之源，符合“有形之血生于无形之气的理论”，又配伍当归养血和营，使阳生阴长，气旺血生。颗粒细胞是卵泡的营养细胞，在卵泡发育期间起重要促进作用。临床屡用当归补血汤显著增加月经量，改善卵巢功能，但机制尚不明确。因此，探讨Smad4蛋白和细胞周期smad4和cyclinA蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及当归黄芪超滤膜提取物对其的增殖作用*赵粉琴，袁爱倩，李娜娜，谢知慧，胡雁云，刘凯△甘肃中医药大学，甘肃兰州730000［摘要］目的：观察smad4和cyclinA蛋白在体外培养大鼠卵巢颗粒细胞中的表达以及当归黄芪超滤膜提取物对其的增殖作用。方法：以不同剂量的当归黄芪超滤膜提取物作用于体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞，用MTS法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞24、48和72小时的增殖情况，并用westrenbolt法监测smad4和cyclinA蛋白的表达。结果:smad4和cyclinA蛋白在颗粒细胞高表达，随着细胞增殖作用的增加，其表达也逐渐增加；当归黄芪超滤膜提取物可促进颗粒细胞的增殖，并且呈一定的量效和时效关系，最佳作用浓度为0.375g/L；各组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:当归黄芪超滤膜提取物有促进卵巢颗粒细胞增殖的作用，能促进卵泡发育，与上调smad4和cyclinA蛋白表达有关。［关键词］大鼠卵巢颗粒细胞；smad4蛋白；cyclinA蛋白；当归黄芪超滤膜提取物［中图分类号］R339.2［文献标识码］A［文章编号］1004-6852(2018)01-0019-04TheExpressionsofsmad4andcyclinAProteininOvarianGranulosaCellsoftheRatsandtheMitogenicEffectsoftheExtractofDangGuiandHuangQiUltrafiltrationMembraneonOvarianGranuloseCellsZHAOFenqin,YUANAiqian,LINana,XIEZhihui,HUYanyun,LIUKai吟GansuUniversityofTraditionalChineseMedicine,Lanzhou730000,ChinaObjective:Toobservetheexpressionsofsmad4andcyclinAproteininovariangranulosacellsculturedinvitrooftheratsandthemitogeniceffectsoftheextractofDangGui(Angelicasinensis)andHuangQi[Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bunge.]ultrafiltrationmembraneontheirexpressions.Methods:AfteractingonovariangranulosacellsculturedinvitrooftheratswithdifferentconcentrationsoftheextractsofDangGuiandHuangQiultrafiltrationmembrane,theproliferationofthegranulosacellsindifferentgroupsin24hours,48hoursand72hourswasdetectedbyMTSmethod,theexpressionsofsmad4andcyclinAproteinweremonitoredbywesternblotmethod.Results:Theexpressionsofsmad4andcyclinAproteinwereinhighlevelsingranulosacells,astheproliferationofcellsincreased,itsexpressionsraisedgradually,theextractsofDangGuiandHuangQiultrafiltrationmembranecouldpromotetheproliferationofgranulosacells,whichdemonstratedcertaindose-effectandtime-effectrelationship,theoptimalactingconcentrationwas0.375g/L,andthedifferencehadstatistica