13.3.1化学污染物的微生物学检测 - 化学污染物的微生物学检测

1第三节第三节化学污染物的微生物学检测化学污染物的微生物学检测一、污染物毒性的细菌学检测污染物毒性的细菌学检测（一）发光细菌检测法的原理发光细菌检测法的原理在环境不良或存在有毒物质时在环境不良或存在有毒物质时，发光细菌发光能力减弱发光细菌发光能力减弱，衰减程度与毒物毒性及其浓度成一定的比例关系衰减程度与毒物毒性及其浓度成一定的比例关系。通过灵通过灵敏的光电测定装置敏的光电测定装置，检测发光细菌受毒物作用时的发光强检测发光细菌受毒物作用时的发光强度变化度变化，可以评价待测物质毒性的大小可以评价待测物质毒性的大小。这种采用发光细这种采用发光细菌检测污染物毒性的方法菌检测污染物毒性的方法，称为称为发光细菌检测法发光细菌检测法*。2目前应用最多的发光细菌是目前应用最多的发光细菌是明亮发光杆菌明亮发光杆菌（Photobacteriumphosphoreum）T3小种小种，其发光反应其发光反应为：为：萤光酶萤光酶FMNH2＋RHO＋O2——→FMN＋RCOOH＋H2O+光萤光素萤光素（FMN）、长链醛长链醛（RHO）和萤光酶萤光酶是细菌发光的是细菌发光的基本要素基本要素。3基于发光细菌检测法的测定结果基于发光细菌检测法的测定结果，可进行毒性等级划分可进行毒性等级划分。IC50毒性级别毒性级别等级等级<25%*很毒很毒125%-75%*有毒有毒275%-100%*微毒微毒3>100%*无毒无毒4表11-4毒性等级划分标准毒性等级划分标准4二、污染物致突变性的细菌学检测污染物致突变性的细菌学检测1、Ames试验法的原理试验法的原理*Ames试验法试验法:美国美国Ames教授创立的一种致突变测定法教授创立的一种致突变测定法。该法利用该法利用组氨酸营养缺陷型组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌鼠伤寒沙门氏菌（Salmonellatyphimurium）可发生回复突变的性能可发生回复突变的性能。在没有受到致突在没有受到致突变物质作用时变物质作用时，这些菌株不能在不含组氨酸的培养基上生这些菌株不能在不含组氨酸的培养基上生长。受到致突变物质作用后受到致突变物质作用后，它们通过基因突变而回复为它们通过基因突变而回复为野生型野生型，可在不含组氨酸的培养基上生长可在不含组氨酸的培养基上生长。5野生型与组氨酸营养缺陷型沙门氏菌间的关系：野生型与组氨酸营养缺陷型沙门氏菌间的关系：野生型野生型his＋正向突变正向突变回复突变回复突变营养缺陷型营养缺陷型his-