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17.1微生物培养基配制与灭菌

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实验四微生物培养基的配制与灭菌目的要求目的要求实验原理实验原理实验材料实验材料实验方法实验方法思考题思考题目的要求目的要求了解微生物培养基的种类及其配制原理,掌握微生了解微生物培养基的种类及其配制原理,掌握微生物培养基的配制程序。物培养基的配制程序。学习并掌握牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯蔗糖琼脂学习并掌握牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯蔗糖琼脂培养基和淀粉琼脂培养基的配制方法。培养基和淀粉琼脂培养基的配制方法。了解几种灭菌方法,掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭了解几种灭菌方法,掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其操作方法。菌法的原理及其操作方法。实验原理实验原理培养基培养基(medium,复数,复数media;或;或culturemedium)指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。产物用的混合营养料。要求要求:提供微生物正常生活所需的各种养料(如碳源提供微生物正常生活所需的各种养料(如碳源、氮源、无机盐类、生长因子等)并保持养料间的平衡、氮源、无机盐类、生长因子等)并保持养料间的平衡;具有适宜的;具有适宜的pHpH、合适的渗透压;保持无菌状态。、合适的渗透压;保持无菌状态。配制培养基的配制培养基的4个原则个原则经济节约经济节约:配制培养基时应尽量利用廉价且易获得的原料配制培养基时应尽量利用廉价且易获得的原料作为培养基组份作为培养基组份,特别是在发酵工业中特别是在发酵工业中,以降低生产成本。以降低生产成本。目的明确目的明确:培养不同的微生物必须采用不同的培养条件。培养不同的微生物必须采用不同的培养条件。培养目的不同,则原料的选择和配比不同。培养目的不同,则原料的选择和配比不同。营养协调营养协调:微生物细胞组成元素的调查或分析,是培养微生物细胞组成元素的调查或分析,是培养基设计的重要参考依据。基设计的重要参考依据。理化适宜理化适宜:指培养基的指培养基的pHpH值、渗透压、水活度和氧化还原值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件较为适宜。电势等物理化学条件较为适宜。例如枯草芽孢杆菌:例如枯草芽孢杆菌:一般培养:一般培养:肉汤培养基或肉汤培养基或LBLB培养基培养基自然转化:自然转化:基础培养基基础培养基观察芽孢:观察芽孢:生孢子培养基生孢子培养基产蛋白酶:产蛋白酶:以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基选择合适的营养物质。细菌:牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)细菌:牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)放线菌:高氏放线菌:高氏1号合成培养基培养号合成培养基培养酵母菌:麦芽汁培养基酵母菌:麦芽汁培养基霉菌:查氏合成培养基霉菌:查氏合成培养基营养物质浓度及配比合适高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑制或杀菌作用。持和促进微生物的生长,反而起到抑制或杀菌作用。以工农业生产中废弃物作为培养微生物的原料:以工农业生产中废弃物作为培养微生物的原料:糖蜜糖蜜(制糖工业中含有蔗糖的废液制糖工业中含有蔗糖的废液);乳清乳清(乳制品工业中含有乳糖的废液乳制品工业中含有乳糖的废液);豆制品工业废液;豆制品工业废液;黑废液黑废液(造纸工业中含戊糖和己糖的亚硫酸纸浆造纸工业中含戊糖和己糖的亚硫酸纸浆)等。等。工业上甲烷发酵主要利用废水废渣作原料。在我国农工业上甲烷发酵主要利用废水废渣作原料。在我国农村,已推广利用粪便及禾草为原料发酵生产甲烷作为燃料。村,已推广利用粪便及禾草为原料发酵生产甲烷作为燃料。实验原理实验原理

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