15.1细菌染色和放线菌形态结构观察

实验二细菌染色与放线菌形态结构观察细菌染色与放线菌形态结构观察目的要求目的要求染色剂和染色的原理染色剂和染色的原理实验材料实验材料实验步骤实验步骤思考题思考题目的要求目的要求学习学习无菌操作无菌操作和细菌涂片细菌涂片的基本技术。的基本技术。掌握细菌掌握细菌简单染色简单染色法和法和革兰氏染色革兰氏染色法。法。熟练运用显微镜油镜。熟练运用显微镜油镜。学习并掌握放线菌形态结构的观察方法，学习并掌握放线菌形态结构的观察方法，理解放线菌的形态特征。理解放线菌的形态特征。染色剂与染色原理染色剂与染色原理微生物个体微小且无色透明，微生物个体微小且无色透明，通过菌体染色可增加通过菌体染色可增加反差反差，显现细菌的一般结构和特殊结构。，显现细菌的一般结构和特殊结构。染色的基本原理：染色的基本原理：借助物理和化学因素的作用，增借助物理和化学因素的作用，增强菌体反差。强菌体反差。物理因素：物理因素：如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。渗透、吸附作用等。化学因素：化学因素：如正负离子之间的相互吸引等。如正负离子之间的相互吸引等。染色剂染色剂染料按染料按其电离后所带电荷的性质其电离后所带电荷的性质，可分为以下类型：，可分为以下类型：1.1.酸性染料酸性染料：如：如酸性复红酸性复红、刚果红、、刚果红、伊红（组织标本）伊红（组织标本）、藻红、苯胺黑等。、藻红、苯胺黑等。2.2.碱性染料碱性染料：细菌等电点为细菌等电点为pH2pH2-5，低于一般环境条件下的，低于一般环境条件下的pHpH值，故带负值，故带负电荷，易被碱性染料染色电荷，易被碱性染料染色。一般有。一般有碱性复红（简单染色）碱性复红（简单染色）、中性红、、中性红、孔雀绿（芽孢）雀绿（芽孢）、番红番红、结晶紫结晶紫、美兰（酵母活性）美兰（酵母活性）、甲基紫等。、甲基紫等。3.3.中性中性(复合复合)染料染料：如：如WrightWright染料和染料和GimsaGimsa染料（常用于细胞核染色）等。染料（常用于细胞核染色）等。4.4.单纯染料单纯染料：这类染料的化学亲和力低，大多是偶氮化合物，不溶于水，：这类染料的化学亲和力低，大多是偶氮化合物，不溶于水，但溶于脂肪溶剂中，如苏丹类但溶于脂肪溶剂中，如苏丹类染料。染料。