18.1微生物分离、培养和菌种保藏

实验五微生物的分离、培养和菌种保藏微生物的分离、培养和菌种保藏目的要求目的要求了解平板划线法分离微生物的基本原理。了解平板划线法分离微生物的基本原理。初步掌握从土壤中分离微生物的技术。初步掌握从土壤中分离微生物的技术。了解几种常用菌种简易保藏的原理。了解几种常用菌种简易保藏的原理。学习常用的菌种简易保藏法。学习常用的菌种简易保藏法。实验原理实验原理土壤是微生物生活的大本营土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现具有重要价值的微是寻找和发现具有重要价值的微生物的主要菌源。在不同土壤中，各类微生物的数量千差万别。生物的主要菌源。在不同土壤中，各类微生物的数量千差万别。为了分离获得某种微生物，需要预先为了分离获得某种微生物，需要预先制备制备不同稀释度的不同稀释度的菌悬液菌悬液，并添加相应的抗生素抑制不需要的微生物；例如，并添加相应的抗生素抑制不需要的微生物；例如，添加链霉素添加链霉素2525～50U/mL50U/mL抑制细菌抑制细菌，添加添加0.5%0.5%的重铬酸钾抑制霉菌的重铬酸钾抑制霉菌。通过通过1010倍稀释以及倍稀释以及平板分离平板分离、平板涂布和平板划线等操作，微、平板涂布和平板划线等操作，微生物可在平板上分散成单个的个体，经过适宜条件培养，单个个体生物可在平板上分散成单个的个体，经过适宜条件培养，单个个体可形成单个菌落。可形成单个菌落。挑取单个菌落转接至新鲜平板上，即可使目的挑取单个菌落转接至新鲜平板上，即可使目的菌种纯化菌种纯化。自然界的微生物是群居杂聚的，为研究某种微生物的特性需分离该微生自然界的微生物是群居杂聚的，为研究某种微生物的特性需分离该微生物纯种。物纯种。纯培养纯培养：从微生物学角度，指在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群：从微生物学角度，指在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代。繁殖得到的后代。要获得某一种菌的纯培养，应首先确定合适的菌种来源，如要获得解酚要获得某一种菌的纯培养，应首先确定合适的菌种来源，如要获得解酚菌可考虑用焦化废水，或焦化厂处理装置中污泥，或是该厂周围的土壤或水菌可考虑用焦化废水，或焦化厂处理装置中污泥，或是该厂周围的土壤或水体作为分离源。体作为分离源。菌落菌落：指生长于固体培养基上，来源于一个或少数几个细胞，肉眼可见：指生长于固体培养基上，来源于一个或少数几个细胞，肉眼可见的细胞群体。的细胞群体。不同的微生物有不同的菌落，细菌、真菌、放线菌有其特定的菌落，可不同的微生物有不同的菌落，细菌、真菌、放线菌有其特定的菌落，可以加以识别和鉴定，并从中移植，从而可以分离。以加以识别和鉴定，并从中移植，从而可以分离。微生物分离微生物分离实验原理实验原理平板分离法平板分离法：混菌法，涂布法，划线法混菌法，涂布法，划线法。该法是利用一个微生物个体（细菌营养体、芽孢；放线菌一该法是利用一个微生物个体（细菌营养体、芽孢；放线菌一个孢子或菌丝片段；霉菌孢子或菌丝）可以在平板上经繁殖形成个孢子或菌丝片段；霉菌孢子或菌丝）可以在平板上经繁殖形成一个菌落的特性。一个菌落的特性。菌落长好后用接种环挑取一个菌落的一小部分，菌落长好后用接种环挑取一个菌落的一小部分，移植到新的培养基（如斜面）上再培养，即可获得纯培养。移植到新的培养基（如斜面）上再培养，即可获得纯培养。平板法还可根据长出的菌落数来计算样品中的微生物数量。平板法还可根据长出的菌落数来计算样品中的微生物数量。除此之外，平板法还可用于：除此之外，平板法还可用于：1）原来的菌种污染了要纯化；）原来的菌种污染了要纯化；2）菌种退化了要复壮；）菌种退化了要复壮；3）一些微生物产品的计数。）一些微生物产品的计数。分离方法分离方法实验原理实验原理