紫外分光光度计使用中不容忽视的几个问题

紫外分光光度计使用中不容忽视的几个问题翟胜强：分竞竞庹计使用中不容忽视的几个问题分光光度计使用中不容忽视的几个问题SomeUnneglectedQuestionsAboutUsingTheSpectrophotometer翟胜强(宁夏计量测试院，宁夏银川750001)摘要：介绍了在分光光度计使用中，吸光度范围的选择、仪器“0”点和基线的校准、比色皿的正确使用对测量结果的影响。关键词：分光光度计；吸光度范围；“O”点和基线的校准；比色皿；测量结果0引言分光光度计已在药检、医疗卫生、化学化工、环保地质、冶金、石油、食品、生命科学、材料科学、农业科学等各个领域的科研、生产中，得到广泛的应用。在定量分析、纯度检查方面更是必备的分析仪器。从事分光光度计计量检定几年来，发现分光光度计使用中存在一些应注意的问题。1应注意待测溶液浓度过高(即吸光度太大)或过低(即吸光度太小)对测试结果准确性的影响在实际工作中，用分光光度计测溶液时，被测溶液浓度太高或太低都能产生比耳定律的偏离，从而使吸光度(透射比)误差变大。吸光度(透射比)误差越大，测量结果的可信性就越差。例如：设某试样的浓度为c，则由朗伯一比尔定律：A=一lgT=e6c(1)式中：A一物质的吸光度；卜物质的透光率；￡一物质的吸光系数；6一被分析物质的光程；c一物质的浓度。将(1)式微分，则：一dlgT：0．434d1nT：T：ebc(2)(1)式除(2)式，则：==dT(3)将(3)式以有限式表示，则：=(4)(4)式中为浓度相对误差，△为透光度绝对误差。一般分光光度计的△约为±0．2％～±2．O％。若按目前大多数分光光度计厂家标准的规定，取△=0．5％，代入(4)式，则计算出不同透光率或不同吸光度值的浓度相对误差如表1所示。由表1可知，浓度测量的相对误差大小和吸光度值所处的范围关系很大。因此在测样中，选择适当的吸光度范围非常重要。目前分光光度计使用者所使用的：721、722、723、752、756等分光光度计的吸光度线性动态范围都很小，有的在(O．2O．9)A左右，因此分光光度计的使用者应注意通过改变吸收池厚度或待测样的浓度，使被测吸光度读数在仪器的吸光度线性动态范围内，从而减小比耳定律的偏离，得到较准确的测量结果。表12应注意仪器“0”点和基线的校准对测试结果准确性的影响仪器“0”点的校准主要针对可见分光光度计中，“0”点和