微孔滤膜过滤除菌

微孔滤膜过滤除菌微孔滤膜过滤除菌关键词：硝酸化学试剂氯化钠菌种试剂标准物质北京标准物质网一、实验目的要求(1)了解过滤除菌的原理。(2)掌握微孔滤膜过滤除菌的方法。二、基本原理尽管有报道称原核细菌小至纳米(10-9m)级，大可达0．1～0．3mm甚至0．75mm(非洲纳米比亚球菌)，一些真核微生物如蘑菇、木耳等担子菌也非常大。但绝大部分微生物都是微米级(10-6mm)，常用的微孔滤膜可以把绝大部分细菌分离开来。过滤除菌是根据微生物的大小，如原核微生物的尺寸为1～10μm(球菌0．5～2μm，杆菌长1～8μm、宽0．5～1μm，螺旋菌长5～50μm、宽0．5～5μm)，真核微生物的尺寸为10～100μm(粗略地说，真核微生物和原核微生物大小存在10：1的递减规律)，选择孔径不同的滤膜，通过机械作用滤去液体或气体中微生物的方法(图1—2)。这是一种非杀灭性除菌方式，实际上达到菌液分离的效果。具体实验应根据不同的需要选用不同的滤器和滤板材料。市面上常见的微孔滤膜有醋酸纤维酯和硝酸纤维酯滤膜等，孔径有0．025μm、0．05μm、0．10μm、0．20μm、0．22μm、0．30μm、0．45μm、0．60μm、0．65μm、0．80μm、1．00μm、2．00μm、3．00μm、5．00μm、7．00μm、8．00μm和10．00μm等，实验室除菌用一般选择0．22μm，但除病毒需选择更小孔径的滤膜。大滤板有石棉滤板、K型滤板(孔径最大，作一般澄清用)、EK滤板(滤孔较小，用以去除一般细菌)、EK-S滤板(滤孔最小，可阻止大病毒通过)。此法除菌的最大优点是可以不破坏溶液中各种物质的化学成分，适用于酶、朊、核酸、抗生素、病毒等活性分子的过滤，但由于滤量有限，所以一般只适用于实验室中小量溶液的过滤除菌。随着反渗透技术的逐渐成熟和成本下降，大规模的过滤除菌工业应用也已经出现：在矿泉水、纯净水生产制作过程中已有应用。三、实验材料与设备1．培养基2％的葡萄糖溶液(葡萄糖试剂需满足HG／T3475—1999《化学试剂葡萄糖》要求)、肉汤朊胨琼脂培养基(平皿)、营养肉汤。肉汤朊胨琼脂培养基配制：朊胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，琼脂16g，调节pH至7．2，分装克氏瓶，每瓶150mL，121℃、20min灭菌，后平放成平板。营养肉汤类有YY／T1187—20