颗粒污泥扫描电镜预处理

颗粒污泥扫描电镜预处理颗粒污泥扫描电镜观察的样品预处理方法（1）取样与清洗：在所需要的不同的反应阶段，从反应器中取出数颗好氧颗粒污泥，放入5mL的离心管中，用去离子水清洗数次，弃去上清液。（2）固定：把清洗好的颗粒污泥加入2.5%，pH为6.8的戊二醛溶液并淹没样品，并置于4℃冰箱中固定2-12小时。（3）冲洗：固定好的好氧颗粒污泥，用0.1mol/L，pH值为6.8的磷酸缓冲溶液冲洗3次，每次10min。（4）脱水：采用梯度乙醇脱水，将冲洗好的样品依次置于系列浓度50%、70%、80%、90%的乙醇进行脱水，每次10-15min，再用100%的乙醇脱水3次，每次10-15min。（5）置换：用乙醇/乙酸异戊酯为1：1的溶液，纯乙酸异戊酯各置换一次，每次15min。（6）干燥：将置换后的样品小心取出，放入滤纸叠成的小盒中，置入干燥器中干燥8小时。（7）粘样与喷金：将干燥好的颗粒污泥样品，用镊子小心取出干燥好的样品，用导电胶把颗粒样品粘附在铝制托盘上，之后用离子溅射镀膜仪（IB-5（Giko）型）在样品表面镀上一层1500nm厚度的金属膜。（8）观测：将处理好的待测样品置于扫描电镜（HITACHIS-4700型）下观察。