厌氧颗粒污泥的超微结构分析

厌氧颗粒污泥的超微结构分析212两种工艺提取的核酸浓度和百分含量去离子水一次抽提法与NaCl溶液分次抽提法所提取的核酸浓度和核酸百分含量经计算结果如表3。表3两种工艺提取的核酸浓度与百分含量提取方法原料名称原料用量(g)核酸制品稀释倍数核酸浓度(μgΠml)核酸含量(%)水提法脱毒棉籽粕粉101003060平菇子实体(鲜)10010034136816盐提法脱毒棉籽粕粉10100381176平菇子实体(鲜)10010040178114注:经实验测定,平菇子实体(鲜)与干子实体质量比为10∶1表3所示,两种工艺比较,核酸制品稀释倍数相同,制品中核酸浓度不同,核酸的百分含量也不同。去离子水一次抽提工艺提取的核酸浓度低,核酸百分含量也低,而NaCl溶液分次抽提工艺核酸浓度和核酸含量均要高,特别是核酸的百分含量已分别达76%和8114%,快接近于标准含量85%,说明NaCl溶液分次抽提法要优于去离子水一次抽提法,工艺较合理。213两种原料的核酸提取率脱毒棉籽粕粉和平菇子实体中核酸的提取率,见图1。图1所示,采用上述两种工艺脱毒棉籽粕粉核酸的提取率分别为1107%和1174%,平菇子实体中核酸的提取率分别为2105%和2148%,都高于大豆等植物细胞的核酸提取率,由此可见,脱毒棉籽粕粉和平菇子实体是两种较为理想的核酸提取原料。3讨论311两种提取核酸工艺的比较:去离子水一次抽提法和NaCl溶液分次抽提法提取核酸工艺的共同之处,采用了无污染工艺,确保了核酸和蛋白质的食用安全,如从细胞中抽提核酸用的是无毒无害的去离子水或NaCl溶液,除去组织蛋白用的是加热工艺,除去结合蛋白用的是无毒的去污剂SDS,沉析DNA和RNA采用的是等电点沉析工艺和乙醇沉淀工艺。两种方法的不同点:(1)去离子水法抽提溶剂是水,对DNA和RNA在水中的溶解度考虑不多,而NaCl溶液法抽提溶剂是0114molΠL和1molΠLNaCl溶液,进行分次抽提,有利于DNA、RNA充分溶解萃取。(2)沉析核酸时NaCl溶液法是等电点沉析,乙醇沉析一次完成,有利于核酸的充分沉析;而去离子水法将等电点沉析与乙醇沉析分开进行,每次有可能造成部分核酸流失,以上两点也是NaCl溶液法的核酸提取率高于去离子水法的原因所在。由表1、表2所知,两种方法提取的核酸样品A260ΠA280值均大于116,说明这两种方法基本适宜于平菇子实体和