三维荧光光谱结合化学分析评价胞外多聚物的提取方法_高景峰-0cc8d33a852458fb770b5

三维荧光光谱结合化学分析评价胞外多聚物的提取方法_高景峰-0cc8d33a852458fb770b5695第27卷第5期2008年9月环境化学ENVIRONMENTALCHEMISTRYVol.27,No.5September20082007年12月20日收稿.3国家自然科学基金项目(50508001);北京市自然科学基金项目(8082007);北京市教育委员会科技发展计划面上项目(KM200510005020);北京市科技新星计划项目A类(2006A10).33责任作者,E2mail:gao1jingfeng@bjut1edu1cn;电话:13651234794三维荧光光谱结合化学分析评价胞外多聚物的提取方法3高景峰33郭建秋陈冉妮苏凯彭永臻(北京工业大学环境与能源工程学院,北京,100124)摘要采用高速离心法、EDTA法、阳离子交换树脂法(CER)、甲醛法和甲醛+NaOH法提取普通活性污泥和好氧颗粒污泥的胞外多聚物(EPS),结合三维荧光光谱对五种方法进行评价,并对EPS中的成分进行分析.结果表明,5个EPS的三维荧光光谱峰值中,2个是类蛋白峰,2个是类富里酸峰,1个是类腐殖酸峰.匀浆对好氧颗粒污泥EPS的提取必不可少.甲醛严重干扰核酸的化学测定.透析前后的EPS提取液均应作为分析对象.单纯高速离心法无法有效提取EPS.CER法不容易造成细胞破壁,是一种比较有效的方法.虽然甲醛+NaOH法对EPS的提取量最大,但对细胞的破壁程度也最大.EDTA会导致溶胞,并严重污染EPS.甲醛+NaOH法和EDTA法都会严重干扰胞外蛋白的三维荧光光谱分析.关键词胞外多聚物,三维荧光光谱,提取,污泥.对胞外多聚物(EPS)通常以EPS中核酸的相对含量作为检验细胞破坏程度的标准.EPS包含大量芳香族结构和带有不同官能团的不饱和脂肪酸[1],这些官能团具有荧光性.它们特有的荧光性质能够为EPS成分的结构、官能团和种类提供信息.三维荧光光谱已经成功用于分析不同来源的溶解性有机物[2—4],Esparza2Soto和Yu曾采用三维荧光光谱仪分析活性污泥中易提取的溶解性EPS[5,6].本试验采用高速离心法、EDTA法、阳离子交换树脂法(CER)、甲醛法、甲醛+NaOH法5种常见的EPS提取方法,以普通活性污泥和好氧颗粒污泥为研究对象,提取测定EPS中蛋白质、多糖和DNA的含量,结合三维